下调VPS4A表达对食管鳞癌恶性生物学行为影响的实验研究

来源 :临床肿瘤学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kiujiabing
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目的 探讨VPS4A对食管鳞癌进展及放射敏感性的影响.方法 转染靶向VPS4A的短发夹RNA(shRNA)慢病毒干扰载体至人食管鳞癌细胞Kyse150和Eca109,构建食管鳞癌细胞VPS4A低表达模型,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blotting验证转染效率.将食管鳞癌分为对照组(NC组)和干扰组(shVPS4A),并且联合辐照,通过平板克隆形成试验检测各组细胞增殖情况;通过流式细胞术以及transwell实验检测VPS4A表达对细胞凋亡和侵袭迁移能力的影响;裸鼠皮下瘤模型用于实验结果的体内验证.结果 与NC组比较,shVPS4A组VPS4A基因和蛋白表达水平明显下降(P<0.05);shVPS4A组在0、2、4、6、8 Gy剂量点的克隆集落数目均少于NC组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组Eca109细胞0 Gy和8 Gy凋亡率为(4.00±0.17)%、(13.60±0.53)%,而下调VPS4A表达后0 Gy和8 Gy凋亡率为(8.03±0.17)%、(18.84±0.58)%;对照组Kyse150细胞0 Gy和8 Gy凋亡率为(3.95±0.13)%、(14.82±0.32)%,而下调VPS4A表达后0 Gy和8 Gy凋亡率分别为(7.81±0.29)%、(18.94±0.34)%.shVPS4A组Eca109细胞和Kyse150细胞迁移、侵袭细胞数均低于NC组,差异具有统计学意义(P<0.05).与NC组比较,shVPS4A组E-cadherin表达升高,N-cadherin和Vimentin表达降低.裸鼠体内成瘤实验结果显示shVPS4A组瘤体质量明显小于NC组.结论 下调VPS4A表达可以提高食管鳞癌细胞的辐射敏感性,促进细胞凋亡以及抑制其侵袭迁移能力,VPS4A有潜力成为食管癌治疗新靶标.
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