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[摘要] 目的 探討派特灵宫颈用药对人乳头瘤病毒（HPV） E6/E7 mRNA的影响及临床意义。 方法 选取2015年1月～2016年10月在我院行阴道镜下宫颈活检病理为CINⅢ及以下病变，并且HPV E6/E7 mRNA持续3个月阳性的患者198例，根据治疗方式不同归为非手术及手术组，两组再随机细分为派特灵用药组及对照组。非手术组共102例，其中用药组48例，对照组54例；手术组共96例，其中用药组46例，对照组50例。用药组予派特灵治疗1个疗程，对照组随访观察，于第6个月、9个月、12个月复查HPV E6/E7 mRNA。分析比较HPV E6/E7 mRNA转阴率、有效率及拷贝水平变化。 结果 非手术用药组第6、9、12个月转阴率分别为45.8%、62.5%、75.0%，有效率分别为81.3%、87.5%、89.6%，显著高于对照组（P<0.05）。手术用药组第6、9、12个月转阴率分别为71.7%、80.4%、82.6%，有效率分别为84.8%、91.3%、89.1%，显著高于对照组（P<0.05）。非手术用药组第6个月、9个月、12个月HPV E6/E7 mRNA拷贝水平下降幅度为56.8%、72.5%、71.5%，手术用药组HPV E6/E7 mRNA拷贝水平下降幅度为74.2%、82.8%、83.9%，均优于对照组（P<0.05）。 结论 派特灵宫颈用药可以降低HPV E6/E7 mRNA拷贝水平，抑制E6/E7癌基因活性，降低宫颈癌发生风险。
[关键词] 派特灵；宫颈；高危型人乳头瘤病毒；HPV E6/E7 mRNA
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2018）25-0074-05
[Abstract] Objective To investigate the effect and clinical significance of Paiteling cervical administration on human papillomavirus（HPV） E6/E7 mRNA. Methods From January 2015 to October 2016， the lesions with CINⅢ and below which were given pathological examination of cervical biopsy under colposcopy in our hospital was selected， and 198 patients with HPV E6/E7 mRNA positive for 3 months were selected. According to different treatment methods， they were classified into non-surgical group and surgical group. The two groups were randomly further divided into Paiteling medication group and control group. 102 patients were in the non-surgical group. There were 48 patients in the medication group and 54 patients in the control group； there were 96 cases in the surgery group， including 46 cases in the medication group and 50 cases in the control group. The medication group was given one course of treatment with Paiteling. The control group was followed up and given the re-examination of HPV E6/E7 mRNA at 6 months， 9 months， and 12 months. The HPV E6/E7 mRNA negative conversion rate， effective rate and copy level changes were analyzed and compared. Results The negative conversion rates in the 6th， 9th， and 12th months in the non-surgical medication group were 45.8%， 62.5%， and 75.0%， respectively. The effective rates were 81.3%， 87.5%， and 89.6%， respectively， significantly higher than those in the control group（P<0.05）. The negative conversion rates in the surgical medication group at the 6th， 9th， and 12th months were 71.7%， 80.4%， and 82.6%， respectively. The effective rates were 84.8%， 91.3%， and 89.1%， respectively， which were significantly higher than those in the control group（P<0.05）. The HPV E6/E7 mRNA copy levels were decreased by 56.8%， 72.5%， and 71.5% at the 6th， 9th， and 12th months in the non-surgical medication group. The HPV E6/E7 mRNA copy levels in the surgical medication group were decreased by 74.2%， 82.8%， and 83.9% respectively， which were all better than those in the control group（P<0.05）. Conclusion Paiteling cervical administration can reduce the HPV E6/E7 mRNA copy levels， inhibit E6/E7 oncogene activity， and reduce the risk of cervical cancer. [Key words] Paiteling； Cervical； High-risk human papillomavirus； HPV E6/E7 mRNA
高危型人乳头瘤病毒（High-risk human papilloma virus，HR-HPV）对生殖道持续感染与宫颈癌的发生密切相关[1]，给女性健康和生命带来了严重威胁。HPV E6/E7基因的整合和过度表达，被认为是宫颈癌发生发展的基本条件[2]，抑制E6/E7癌基因的表达能降低宫颈癌的发生率。
派特灵中药制剂曾被用于尖锐湿疣的治疗[3]，也有研究证实其对HPV感染有清除作用[4]。但年轻女性中的HPV感染多为一过性，不采取干预可自行消退，对这部分患者使用药物通常会导致过度治疗。本研究筛选出HPV E6/E7 mRNA阳性，真正存在宫颈癌高风险的患者，探讨派特灵宫颈用药对HPV E6/E7 mRNA的影响及临床意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2015年1月～2016年10月在本院妇科门诊行TCT、HPV分型及HPV E6/E7 mRNA检测，其中HPV E6/E7 mRNA阳性并有指征行阴道镜下宫颈活检者，组织病理学结果为以下之一：正常或慢性宫颈炎；宫颈上皮内瘤变（Cervical intraepithelial neoplasias，CIN）Ⅰ～Ⅲ级。根据宫颈病变程度所需的治疗方式不同分为非手术组及手术组。其中非手术组包括病理为慢性宫颈炎及CINⅠ者；手术组包括活检病理为CINⅡ～Ⅲ需行宫颈环形电切术（Loop electrosurgical excision procedure，LEEP）或宫颈锥切术者。
入选标准：①非手术组阴道镜下宫颈活检术后3个月、手术组术后3个月复查HPV E6/E7 mRNA仍为阳性；②同意按规定治疗和（或）随访，签署知情同意书者；③既往无宫颈物理治疗史或手术史；④心、肝、肾等功能正常。
非手术组及手术组各随机分为派特灵用药组及对照组。非手术组共102例，其中用药组48例，对照组54例；手术组共96例，其中用药组46例，对照组50例。
1.2 方法
1.2.1 检测方法 （1）HPV E6/E7 mRNA检测：取TCT标本，采用支链DNA信号放大技术（即bDNA法）检测脱落细胞中14种高危型HPV E6/E7 mRNA水平，包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68型。试剂盒购自河南中美合资科蒂亚生物技术有限公司（Kodia Biotechnology Inc）。拷贝数>1 copy/mL为阳性。（2）TCT：采用TCT专用毛刷取样，宫颈细胞学诊断按照国际癌症协会推荐的2001年TBS（The Bethesda System）分类法。
1.2.2 手术方法 （1）LEEP 取膀胱截石位、消毒、充分暴露宫颈后，对宫颈行碘酊涂抹，标记病变部位，沿病灶及其外缘约0.5 cm处做深约2.0～2.5 cm切除；宫颈12点处作标记，送病理检查；创面电凝止血，使用湿润烧伤膏涂抹创面。（2）宫颈锥切术 腰麻后取膀胱截石位，常规消毒铺巾，置入阴道窥器并消毒阴道和宫颈，将碘溶液涂抹于宫颈，在距不着色区边缘外 5 mm处锥形切除宫颈组织，锥高 20～25 mm。术后电凝止血，填塞碘伏纱条，于术后 24 h 取出。宫颈12点处作标记，送病理检查。
1.2.3 治療及随访 派特灵由中国科学院北京派特博恩生物技术开发有限公司生产，许可证号：（津）卫消证字（2015）第0450号，规格30 mL。派特灵治疗组患者由经专门培训人员进行给药，第一阶段取派特灵原液3 mL置于宫颈管及宫颈，用3 d停4 d为1个周期，共6周；第二阶段取1 mL派特灵用50 mL温开水稀释，1：50稀释液阴道冲洗1个月经周期，每天1次；完成两阶段为1个疗程。自入组后第6个月、9个月、12个月行TCT和HPV E6/E7 mRNA双项复查。对照组患者仅观察随访，不做治疗。
1.3 疗效评价
不同组治疗前后HPV E6/E7 mRNA拷贝数变化比较采用均一化处理，即每个个体的初始HPV E6/E7 mRNA拷贝数设定为100%，6个月、9个月、12个月后根据初始拷贝数计算相对的变化率。并根据HPV E6/E7 mRNA水平的变化程度来判断疗效。各组变化率的计算方法说明：①转阴：HPV E6/E7 mRNA复查结果为≤1 copy/mL；②有效：HPV E6/E7 mRNA复查结果拷贝数明显下降（≥30%）；③无效：HPV E6/E7 mRNA持续升高，或下降不明显（<30%）[5]。
1.4 统计学分析
采用SPSS19.0进行统计学分析，计量资料如年龄及HPV E6/E7 mRNA拷贝数方差不齐，用M（P25，P75）表示，比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料比较采用χ2检验。不同组在用药后3个月、6个月、12个月的HPV E6/E7 mRNA拷贝数变化率，采用Mann-Whitney U检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组一般情况比较
非手术及手术两组患者间的年龄、HPV E6/E7 mRNA拷贝水平相比较，差异无统计学意义（P均>0.05），具有可比性，见表1。
2.2各组不同时期HPV E6/E7 mRNA转阴率及有效率比较
非手术患者共102例，其中用药组48例，对照组54例，至6、9、12个月时，用药组HPV E6/E7 mRNA转阴率分别为45.8%、62.5%、75.0%，有效率分别为81.3%、87.5%、89.6%，显著高于对照组（P均<0.05）。手术患者96例，其中用药组46例，对照组50例，随访至6、9、12个月时，用药组HPV E6/E7 mRNA转阴率分别为71.7%、80.4%、82.6%，有效率分别为84.8%、91.3%、89.1%，显著高于对照组（P均<0.05），见表2。 2.3 各组患者治疗前后 HPV E6/E7 mRNA水平变化比较
非手术用药组患者第6个月、9个月、12个月的HPV E6/E7 mRNA拷贝水平分别下降56.8%、72.5%、71.5%，对照组分别下降13.6%、20.4%、15.7%，用药组HPV E6/E7 mRNA下降幅度高于对照组，差异有显著性（Z=-4.216、-4.151、-4.359，P均<0.001）（图1）。手术用药组患者第6个月、9个月、12个月的HPV E6/E7 mRNA拷贝水平分别下降74.2%、82.8%、83.9%，对照组分别下降45.9%、53.0%、56.4%，用药组HPV E6/E7 mRNA下降幅度高于对照组，差异有显著性（Z=-2.880、-3.226、-2.914，P均<0.05）（图2）。
3 讨论
高危HPV感染的早期干预原则是“治病即治毒”，治疗HPV感染引起的病变，能阻断病毒导致宫颈癌的路径，甚至最终清除病毒。但有研究表明，CIN Ⅱ～Ⅲ术后临床病灶的消除并不意味着所有感染组织已被根除，仍有40%的治疗后妇女存在HR-HPV阳性，而术后HPV的持续感染是疾病复发和进展的高危因素[6]。对于这部分患者，不能任其随访，直至组织学病变发生再进行治疗。另外，近年来国外有学者提出精子可以携带HPV进入卵母细胞，病毒基因被激活和转录后将抑制滋养层黏附，从而影响胚胎植入，并能诱导异常的胎盘生长，导致自然流产[7，8]。对于有生育要求的妇女，HPV进行性感染可能是妊娠的潜在威胁。因此，治毒而防病应当是疾病研究的首要任务。由于HPV在年轻女性中的感染多为一过性，80%～90%的女性在HPV感染后的10～18个月能自行消除[9]，这些女性并没有治疗的必要，过度的干预反而增加患者经济和心理上的负担，这是以往不提倡治毒的根本原因。HPV感染后E6/E7癌基因的整合和失控导致E6/E7癌蛋白的持续高表达是肿瘤发生和进展的重要因素[10]。HPV E6/E7 mRNA作为病毒癌基因转录的产物，其拷贝水平能充分体现HPV致癌基因活动程度，在识别HPV进行性感染中存在优势，能筛选出真正具有宫颈癌高风险的患者[11，12]。对HPV E6/E7 mRNA阳性的患者进行风险管理和针对性的治疗，是相当必要的。
派特灵是以鸦胆子、白花舌草、苦参、大青叶、蛇床子等药物为主要成分的纯中药制剂。大青叶、苦参、蛇床子等可干扰、阻止HPV DNA合成，抑制病毒复制，同时具有清热解毒、活血化瘀、提高和激发自身免疫的作用[13]。鸦胆子油的主要活性成分为苦木内酯化合物，能选择性破坏癌肿瘤细胞膜和线粒体等膜性系统，使癌细胞发生退行性变与坏死，而对正常细胞无损害，具有抗肿瘤、抗炎、提高机体免疫力的作用[14，15]。派特灵的细胞抑制作用及轻度剥脱作用是治疗HPV感染的药理学基础，能使寄生在表皮细胞内HPV病毒来不及复制繁殖就随着细胞脱落而被彻底清除[16，17]。
有研究证实，派特灵能改善和调节宫颈局部的免疫状态，对HPV感染有清除作用[18，19]。陶萍萍等[20]比较分析239例病理为CIN Ⅱ及以下病变的患者，使用派特灵组的病灶消退率和HR-HPV转阴率均高于对照组，认为派特灵宫颈上药可逆转HR-HPV感染。本研究发现，非手术及手术患者派特灵用药后各时期HPV E6/E7 mRNA转阴率、好转率均优于对照组，且用藥后HPV E6/E7 mRNA拷贝水平下降幅度明显高于对照组，证实派特灵宫颈用药的确能抑制HPV E6/E7癌基因活性，降低HPV E6/E7 mRNA拷贝数，减少癌蛋白表达，从根源上阻断宫颈细胞向癌前病变甚至是恶性肿瘤的转变过程，对于CIN Ⅱ～Ⅲ术后或者CINⅠ及以下病变HPV E6/E7 mRNA持续阳性的高危患者，具有治疗作用。LEEP或宫颈锥切术后病理切缘阴性患者，病灶的残留或复发可能与CIN病灶不连续，宫颈管更深处存在CIN，或隐匿性、持续性感染的HPV再活化相关。派特灵的剥脱作用能使残余病灶清除，同时降低HPV癌基因活性，导致HPV E6/E7 mRNA拷贝下降或转阴，减少术后复发风险。
本研究中1例CINⅠ患者用药后HPV E6/E7 mRNA下降但未转阴，12个月复查HPV E6/E7 mRNA上升至7441.25 copy/mL，再次行阴道镜下宫颈活检，病理提示CIN Ⅱ。本研究认为派特灵在短期内对HPV E6/E7 mRNA的抑制作用是肯定的，但停药后可能由于病毒活力恢复或HPV再次感染而出现病情进展或复发。因此，在应用派特灵1个疗程后，HPV E6/E7 mRNA水平下降而未转阴者，可继续第2疗程。
综上所述，派特灵能降低HPV E6/E7 mRNA拷贝水平，对于HPV E6/E7 mRNA持续阳性的CINⅡ～Ⅲ手术后患者，应选择派特灵治疗，能使残余病灶剥脱并抑制E6/E7癌基因活动；对于CINⅠ及以下病变有生育要求的患者，在目前没有治疗性疫苗的情况下，宫颈局部派特灵治疗是安全可行的，这有利于胚胎正常着床和发育，存在临床应用价值。
[参考文献]
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（收稿日期：2018-04-10）
[关键词] 派特灵；宫颈；高危型人乳头瘤病毒；HPV E6/E7 mRNA
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2018）25-0074-05
[Abstract] Objective To investigate the effect and clinical significance of Paiteling cervical administration on human papillomavirus（HPV） E6/E7 mRNA. Methods From January 2015 to October 2016， the lesions with CINⅢ and below which were given pathological examination of cervical biopsy under colposcopy in our hospital was selected， and 198 patients with HPV E6/E7 mRNA positive for 3 months were selected. According to different treatment methods， they were classified into non-surgical group and surgical group. The two groups were randomly further divided into Paiteling medication group and control group. 102 patients were in the non-surgical group. There were 48 patients in the medication group and 54 patients in the control group； there were 96 cases in the surgery group， including 46 cases in the medication group and 50 cases in the control group. The medication group was given one course of treatment with Paiteling. The control group was followed up and given the re-examination of HPV E6/E7 mRNA at 6 months， 9 months， and 12 months. The HPV E6/E7 mRNA negative conversion rate， effective rate and copy level changes were analyzed and compared. Results The negative conversion rates in the 6th， 9th， and 12th months in the non-surgical medication group were 45.8%， 62.5%， and 75.0%， respectively. The effective rates were 81.3%， 87.5%， and 89.6%， respectively， significantly higher than those in the control group（P<0.05）. The negative conversion rates in the surgical medication group at the 6th， 9th， and 12th months were 71.7%， 80.4%， and 82.6%， respectively. The effective rates were 84.8%， 91.3%， and 89.1%， respectively， which were significantly higher than those in the control group（P<0.05）. The HPV E6/E7 mRNA copy levels were decreased by 56.8%， 72.5%， and 71.5% at the 6th， 9th， and 12th months in the non-surgical medication group. The HPV E6/E7 mRNA copy levels in the surgical medication group were decreased by 74.2%， 82.8%， and 83.9% respectively， which were all better than those in the control group（P<0.05）. Conclusion Paiteling cervical administration can reduce the HPV E6/E7 mRNA copy levels， inhibit E6/E7 oncogene activity， and reduce the risk of cervical cancer. [Key words] Paiteling； Cervical； High-risk human papillomavirus； HPV E6/E7 mRNA
高危型人乳头瘤病毒（High-risk human papilloma virus，HR-HPV）对生殖道持续感染与宫颈癌的发生密切相关[1]，给女性健康和生命带来了严重威胁。HPV E6/E7基因的整合和过度表达，被认为是宫颈癌发生发展的基本条件[2]，抑制E6/E7癌基因的表达能降低宫颈癌的发生率。
派特灵中药制剂曾被用于尖锐湿疣的治疗[3]，也有研究证实其对HPV感染有清除作用[4]。但年轻女性中的HPV感染多为一过性，不采取干预可自行消退，对这部分患者使用药物通常会导致过度治疗。本研究筛选出HPV E6/E7 mRNA阳性，真正存在宫颈癌高风险的患者，探讨派特灵宫颈用药对HPV E6/E7 mRNA的影响及临床意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2015年1月～2016年10月在本院妇科门诊行TCT、HPV分型及HPV E6/E7 mRNA检测，其中HPV E6/E7 mRNA阳性并有指征行阴道镜下宫颈活检者，组织病理学结果为以下之一：正常或慢性宫颈炎；宫颈上皮内瘤变（Cervical intraepithelial neoplasias，CIN）Ⅰ～Ⅲ级。根据宫颈病变程度所需的治疗方式不同分为非手术组及手术组。其中非手术组包括病理为慢性宫颈炎及CINⅠ者；手术组包括活检病理为CINⅡ～Ⅲ需行宫颈环形电切术（Loop electrosurgical excision procedure，LEEP）或宫颈锥切术者。
入选标准：①非手术组阴道镜下宫颈活检术后3个月、手术组术后3个月复查HPV E6/E7 mRNA仍为阳性；②同意按规定治疗和（或）随访，签署知情同意书者；③既往无宫颈物理治疗史或手术史；④心、肝、肾等功能正常。
非手术组及手术组各随机分为派特灵用药组及对照组。非手术组共102例，其中用药组48例，对照组54例；手术组共96例，其中用药组46例，对照组50例。
1.2 方法
1.2.1 检测方法 （1）HPV E6/E7 mRNA检测：取TCT标本，采用支链DNA信号放大技术（即bDNA法）检测脱落细胞中14种高危型HPV E6/E7 mRNA水平，包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68型。试剂盒购自河南中美合资科蒂亚生物技术有限公司（Kodia Biotechnology Inc）。拷贝数>1 copy/mL为阳性。（2）TCT：采用TCT专用毛刷取样，宫颈细胞学诊断按照国际癌症协会推荐的2001年TBS（The Bethesda System）分类法。
1.2.2 手术方法 （1）LEEP 取膀胱截石位、消毒、充分暴露宫颈后，对宫颈行碘酊涂抹，标记病变部位，沿病灶及其外缘约0.5 cm处做深约2.0～2.5 cm切除；宫颈12点处作标记，送病理检查；创面电凝止血，使用湿润烧伤膏涂抹创面。（2）宫颈锥切术 腰麻后取膀胱截石位，常规消毒铺巾，置入阴道窥器并消毒阴道和宫颈，将碘溶液涂抹于宫颈，在距不着色区边缘外 5 mm处锥形切除宫颈组织，锥高 20～25 mm。术后电凝止血，填塞碘伏纱条，于术后 24 h 取出。宫颈12点处作标记，送病理检查。
1.2.3 治療及随访 派特灵由中国科学院北京派特博恩生物技术开发有限公司生产，许可证号：（津）卫消证字（2015）第0450号，规格30 mL。派特灵治疗组患者由经专门培训人员进行给药，第一阶段取派特灵原液3 mL置于宫颈管及宫颈，用3 d停4 d为1个周期，共6周；第二阶段取1 mL派特灵用50 mL温开水稀释，1：50稀释液阴道冲洗1个月经周期，每天1次；完成两阶段为1个疗程。自入组后第6个月、9个月、12个月行TCT和HPV E6/E7 mRNA双项复查。对照组患者仅观察随访，不做治疗。
1.3 疗效评价
不同组治疗前后HPV E6/E7 mRNA拷贝数变化比较采用均一化处理，即每个个体的初始HPV E6/E7 mRNA拷贝数设定为100%，6个月、9个月、12个月后根据初始拷贝数计算相对的变化率。并根据HPV E6/E7 mRNA水平的变化程度来判断疗效。各组变化率的计算方法说明：①转阴：HPV E6/E7 mRNA复查结果为≤1 copy/mL；②有效：HPV E6/E7 mRNA复查结果拷贝数明显下降（≥30%）；③无效：HPV E6/E7 mRNA持续升高，或下降不明显（<30%）[5]。
1.4 统计学分析
采用SPSS19.0进行统计学分析，计量资料如年龄及HPV E6/E7 mRNA拷贝数方差不齐，用M（P25，P75）表示，比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料比较采用χ2检验。不同组在用药后3个月、6个月、12个月的HPV E6/E7 mRNA拷贝数变化率，采用Mann-Whitney U检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组一般情况比较
非手术及手术两组患者间的年龄、HPV E6/E7 mRNA拷贝水平相比较，差异无统计学意义（P均>0.05），具有可比性，见表1。
2.2各组不同时期HPV E6/E7 mRNA转阴率及有效率比较
非手术患者共102例，其中用药组48例，对照组54例，至6、9、12个月时，用药组HPV E6/E7 mRNA转阴率分别为45.8%、62.5%、75.0%，有效率分别为81.3%、87.5%、89.6%，显著高于对照组（P均<0.05）。手术患者96例，其中用药组46例，对照组50例，随访至6、9、12个月时，用药组HPV E6/E7 mRNA转阴率分别为71.7%、80.4%、82.6%，有效率分别为84.8%、91.3%、89.1%，显著高于对照组（P均<0.05），见表2。 2.3 各组患者治疗前后 HPV E6/E7 mRNA水平变化比较
非手术用药组患者第6个月、9个月、12个月的HPV E6/E7 mRNA拷贝水平分别下降56.8%、72.5%、71.5%，对照组分别下降13.6%、20.4%、15.7%，用药组HPV E6/E7 mRNA下降幅度高于对照组，差异有显著性（Z=-4.216、-4.151、-4.359，P均<0.001）（图1）。手术用药组患者第6个月、9个月、12个月的HPV E6/E7 mRNA拷贝水平分别下降74.2%、82.8%、83.9%，对照组分别下降45.9%、53.0%、56.4%，用药组HPV E6/E7 mRNA下降幅度高于对照组，差异有显著性（Z=-2.880、-3.226、-2.914，P均<0.05）（图2）。
3 讨论
高危HPV感染的早期干预原则是“治病即治毒”，治疗HPV感染引起的病变，能阻断病毒导致宫颈癌的路径，甚至最终清除病毒。但有研究表明，CIN Ⅱ～Ⅲ术后临床病灶的消除并不意味着所有感染组织已被根除，仍有40%的治疗后妇女存在HR-HPV阳性，而术后HPV的持续感染是疾病复发和进展的高危因素[6]。对于这部分患者，不能任其随访，直至组织学病变发生再进行治疗。另外，近年来国外有学者提出精子可以携带HPV进入卵母细胞，病毒基因被激活和转录后将抑制滋养层黏附，从而影响胚胎植入，并能诱导异常的胎盘生长，导致自然流产[7，8]。对于有生育要求的妇女，HPV进行性感染可能是妊娠的潜在威胁。因此，治毒而防病应当是疾病研究的首要任务。由于HPV在年轻女性中的感染多为一过性，80%～90%的女性在HPV感染后的10～18个月能自行消除[9]，这些女性并没有治疗的必要，过度的干预反而增加患者经济和心理上的负担，这是以往不提倡治毒的根本原因。HPV感染后E6/E7癌基因的整合和失控导致E6/E7癌蛋白的持续高表达是肿瘤发生和进展的重要因素[10]。HPV E6/E7 mRNA作为病毒癌基因转录的产物，其拷贝水平能充分体现HPV致癌基因活动程度，在识别HPV进行性感染中存在优势，能筛选出真正具有宫颈癌高风险的患者[11，12]。对HPV E6/E7 mRNA阳性的患者进行风险管理和针对性的治疗，是相当必要的。
派特灵是以鸦胆子、白花舌草、苦参、大青叶、蛇床子等药物为主要成分的纯中药制剂。大青叶、苦参、蛇床子等可干扰、阻止HPV DNA合成，抑制病毒复制，同时具有清热解毒、活血化瘀、提高和激发自身免疫的作用[13]。鸦胆子油的主要活性成分为苦木内酯化合物，能选择性破坏癌肿瘤细胞膜和线粒体等膜性系统，使癌细胞发生退行性变与坏死，而对正常细胞无损害，具有抗肿瘤、抗炎、提高机体免疫力的作用[14，15]。派特灵的细胞抑制作用及轻度剥脱作用是治疗HPV感染的药理学基础，能使寄生在表皮细胞内HPV病毒来不及复制繁殖就随着细胞脱落而被彻底清除[16，17]。
有研究证实，派特灵能改善和调节宫颈局部的免疫状态，对HPV感染有清除作用[18，19]。陶萍萍等[20]比较分析239例病理为CIN Ⅱ及以下病变的患者，使用派特灵组的病灶消退率和HR-HPV转阴率均高于对照组，认为派特灵宫颈上药可逆转HR-HPV感染。本研究发现，非手术及手术患者派特灵用药后各时期HPV E6/E7 mRNA转阴率、好转率均优于对照组，且用藥后HPV E6/E7 mRNA拷贝水平下降幅度明显高于对照组，证实派特灵宫颈用药的确能抑制HPV E6/E7癌基因活性，降低HPV E6/E7 mRNA拷贝数，减少癌蛋白表达，从根源上阻断宫颈细胞向癌前病变甚至是恶性肿瘤的转变过程，对于CIN Ⅱ～Ⅲ术后或者CINⅠ及以下病变HPV E6/E7 mRNA持续阳性的高危患者，具有治疗作用。LEEP或宫颈锥切术后病理切缘阴性患者，病灶的残留或复发可能与CIN病灶不连续，宫颈管更深处存在CIN，或隐匿性、持续性感染的HPV再活化相关。派特灵的剥脱作用能使残余病灶清除，同时降低HPV癌基因活性，导致HPV E6/E7 mRNA拷贝下降或转阴，减少术后复发风险。
本研究中1例CINⅠ患者用药后HPV E6/E7 mRNA下降但未转阴，12个月复查HPV E6/E7 mRNA上升至7441.25 copy/mL，再次行阴道镜下宫颈活检，病理提示CIN Ⅱ。本研究认为派特灵在短期内对HPV E6/E7 mRNA的抑制作用是肯定的，但停药后可能由于病毒活力恢复或HPV再次感染而出现病情进展或复发。因此，在应用派特灵1个疗程后，HPV E6/E7 mRNA水平下降而未转阴者，可继续第2疗程。
综上所述，派特灵能降低HPV E6/E7 mRNA拷贝水平，对于HPV E6/E7 mRNA持续阳性的CINⅡ～Ⅲ手术后患者，应选择派特灵治疗，能使残余病灶剥脱并抑制E6/E7癌基因活动；对于CINⅠ及以下病变有生育要求的患者，在目前没有治疗性疫苗的情况下，宫颈局部派特灵治疗是安全可行的，这有利于胚胎正常着床和发育，存在临床应用价值。
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（收稿日期：2018-04-10）