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摘要：产地不同，葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元、总黄酮这几种成分的含量存在一定的差异。对不同产地葛根药材的化学成分进行详细地测定，为葛根药材质量标准提供一定的理论支持，分析研究结果可以将其作为研究此物质量标准提供一定的理论帮助。
关键词：葛根;产地不同;化学成分;总黄酮
【中图分类号】R197 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2019）10-0218-03
葛根主产于河南、湖南等地区。其用途比较广泛，可以缓解发热的症状，还可以升阳止泻等。它是一种豆科植物，葛根的主要的成分包括葛根素、大豆苷、大豆苷元等成分。同时还包括一定的黄酮类物质、多糖以及很多的微量元素。葛根是一种分布十分广泛的药材。产地不一致，从而导致质量方面存在一定的差异。为了对药材的质量进行合理的控制，同时制定一定的标准，本次实验通过对不同产地的葛根药材中葛根素、大豆苷、大豆苷元、总黄酮进行详细地分析和测定，希望可以对葛根药材质量的控制提供一定的帮助。实验如下：
一、仪器、试剂及样品
高效液相色谱仪;色谱柱;真空泵;外分光光度计;电子天平;葛根样品;甲醇;乙醇;水。
二 、方法与结论
2.1葛根素含量的测定：在进行测定时，主要运用中国药典中的测定方法进行测定，测定结果如下图1所示：
2.2大豆苷、大豆苷元含量测定
2.2.1色谱条件 （如图二所示）
根据图2 的色谱图，可以明显地看出大豆苷、大豆苷元与其他成分分离的效果是很可观的，理论塔板数均高于4000。
2.2.2制备对照品溶液
用天平准确地称取大豆苷，大豆苷元的对照样品需按实际情况适量称取，加70%乙醇分别制成0.2和0.1mg/mL溶液.
2.2.3制备供试品溶液
用天平准确地称取药材细粉0.2克，放在100mL平底的烧瓶内;加入20ML70%的乙醇溶液;密封处理;对其称重;加热回流2h进行提取;冷却;继续用乙醇溶液补充溶液恢复至原刻度线的位置。
2.2.4精密度分析
对大豆苷以及大豆苷元对照品溶液进行精密吸取，体积分别为10ML，对两者分别连续进样5次，RSD分别为1.3%和1.5%，说明仪器具备良好的精密度。
2.2.5稳定性试验分析
对供试品溶液分别进行精密吸取，分别于0，2，4，6，8，10，12 等不同的时刻进样10ML，大豆苷和大豆苷元RSD分别为1.7%和1.3% ，表明供试液整个阶段内属于稳定状态。
2.2.6重复性试验
用天平准确地称取同一样品的粉末各6份，每一份质量为0.2g，重复上述制备供试液的方法继续制此溶液，测得大豆 苷、大豆苷元的平均含量没有明显地变化， RSD也是比较稳定的，这一结果表面该实验的方法的重复性方面基本没有问题。
2.2.7加样回收率试验分析
取同样的葛根粉末各6份，每一份大约在0.1g左右，在每份样品中加入一定量的大豆苷和大豆苷元的對照品。重复上述操作制备供试液，测定结果如表1所示。
从表格可以看出回收率比较可观。
2.3总黄酮含量实验分析
2.3.1制备对照品的溶液：称取葛根素的标准品20mg于100mL量瓶中，注意称取时尽量准确，加95%的乙醇溶解进行稀释处理，达到标准刻度位置的同时需要进行摇匀处理，避免一定的误差出现。
2.3.2制备供试品溶液：用天平准确地称取葛根粉末0.4 g于100ML的锥形瓶中，加进95%乙醇60 mL;放在热水中进行加热处理;大约50min并在加热时及时进行振摇处理;时间结束后进行冷却处理;加乙醇补足到原刻度线位置;摇匀处理;静置一段时间使溶液澄清;吸取上清液2 mL左右导入到25 mL的量瓶中;加入适量的蒸馏水进行稀释;恢复原刻度线位置并作摇匀处理。
2.3.3最大吸收峰的确定：吸取对照品溶液和供试品溶液，吸取时需要注意两点，一是吸取需精准，二是吸取需适量。以2mL 95%乙醇加水稀释至20mL量瓶中作为主要的对照溶液，进行扫描处理，结果显示在250nm附近的时候有最大吸收强度。
2.3.4精密度分析：对黄酮对照品溶液进行精密吸取，在250nm的时候测定其吸收光照的程度，连续操作5次，RSD为0.1%，说明仪器具备良好的精密度。
2.3.5稳定性试验分析：吸取同一种供试品溶液，在制备60min（每间隔10min测量一次）时间内分别测定其吸收光照的程度，测得RSD在60分钟之内变化处于稳定的状态，因此可以说明此实验的稳定性良好，不会因此而出现一定的误差现象。
2.2.6重复性试验：用天平准确地称取同一样品的粉末各6份，每一份质量为0.4g，重复上述制备供试液的方法继续制此溶液，在250nm下测定其吸收光照的强度，在此位置RSD为1%左右，这一结果表面该实验的方法的重复性方面基本没有问题。
2.2.7加样回收率试验分析：取同样的葛根粉末各6份，每一份大约在0.1g左右，在每份样品中加入一定量的葛根素作为主要的对照样品。重复上述操作制备供试液，测定结果如表2所示。
2.4不同地区的葛根成分分析
通过检测测出不同地区葛根含量明细如下（图3）
三、讨论
对大豆苷、大豆苷元标准品溶液进行紫外全波长的扫面，再加上对样品溶液进行紫外全波长扫描，结果显示都是在248 nm处吸收程度比较好，因此通过实验分析出大豆苷、大豆苷元含量进行相关的测定是时选择测定波长为248 nm时效果是最明显的，因此这个数值可以被用来以后的测定和研究，可以节省一定的人力、物力和财力。葛根中的黄酮物质对乙醇比较容易吸收，通过实验的分析可以发现，当浓度为70%时，乙醇提取大豆苷、大豆苷元效果是比较好的，因此在进行测定的时候一般可以采用70%的乙醇来进行操作。另外当大豆苷的元峰与其它峰交互在一起时。经过试验选用甲醇～水按上述实验的操作步骤进行，使大豆苷，大豆苷元可以完全分离的状态，这样往往分离效果是比较明显，方便结果分析。
四、总结
本实验主要是根据葛根的多种成分进行详细地分析，对收集的不同地区的葛根样品进质量分析，结果表明，产地不同，葛根的质量上均存在一定的差异。因此在不断地研究中，对于药材的产地和不同的品种之间进行相应的研究，可以在一定程度上对药材的质量进行保证。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[s].一部，北 京：化学工业出版社，2005：233.
[2] 易红，杨华.葛根的品种产地和提取工艺研究进展 概况[J].中国实验方剂学杂志，2006（11）：60.
[3] 冀春茹，王浴铭，刘延泽，等.中药化学实验技术与实验 [M].郑州：河南科学技术出版社，1986：281.
关键词：葛根;产地不同;化学成分;总黄酮
【中图分类号】R197 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2019）10-0218-03
葛根主产于河南、湖南等地区。其用途比较广泛，可以缓解发热的症状，还可以升阳止泻等。它是一种豆科植物，葛根的主要的成分包括葛根素、大豆苷、大豆苷元等成分。同时还包括一定的黄酮类物质、多糖以及很多的微量元素。葛根是一种分布十分广泛的药材。产地不一致，从而导致质量方面存在一定的差异。为了对药材的质量进行合理的控制，同时制定一定的标准，本次实验通过对不同产地的葛根药材中葛根素、大豆苷、大豆苷元、总黄酮进行详细地分析和测定，希望可以对葛根药材质量的控制提供一定的帮助。实验如下：
一、仪器、试剂及样品
高效液相色谱仪;色谱柱;真空泵;外分光光度计;电子天平;葛根样品;甲醇;乙醇;水。
二 、方法与结论
2.1葛根素含量的测定：在进行测定时，主要运用中国药典中的测定方法进行测定，测定结果如下图1所示：
2.2大豆苷、大豆苷元含量测定
2.2.1色谱条件 （如图二所示）
根据图2 的色谱图，可以明显地看出大豆苷、大豆苷元与其他成分分离的效果是很可观的，理论塔板数均高于4000。
2.2.2制备对照品溶液
用天平准确地称取大豆苷，大豆苷元的对照样品需按实际情况适量称取，加70%乙醇分别制成0.2和0.1mg/mL溶液.
2.2.3制备供试品溶液
用天平准确地称取药材细粉0.2克，放在100mL平底的烧瓶内;加入20ML70%的乙醇溶液;密封处理;对其称重;加热回流2h进行提取;冷却;继续用乙醇溶液补充溶液恢复至原刻度线的位置。
2.2.4精密度分析
对大豆苷以及大豆苷元对照品溶液进行精密吸取，体积分别为10ML，对两者分别连续进样5次，RSD分别为1.3%和1.5%，说明仪器具备良好的精密度。
2.2.5稳定性试验分析
对供试品溶液分别进行精密吸取，分别于0，2，4，6，8，10，12 等不同的时刻进样10ML，大豆苷和大豆苷元RSD分别为1.7%和1.3% ，表明供试液整个阶段内属于稳定状态。
2.2.6重复性试验
用天平准确地称取同一样品的粉末各6份，每一份质量为0.2g，重复上述制备供试液的方法继续制此溶液，测得大豆 苷、大豆苷元的平均含量没有明显地变化， RSD也是比较稳定的，这一结果表面该实验的方法的重复性方面基本没有问题。
2.2.7加样回收率试验分析
取同样的葛根粉末各6份，每一份大约在0.1g左右，在每份样品中加入一定量的大豆苷和大豆苷元的對照品。重复上述操作制备供试液，测定结果如表1所示。
从表格可以看出回收率比较可观。
2.3总黄酮含量实验分析
2.3.1制备对照品的溶液：称取葛根素的标准品20mg于100mL量瓶中，注意称取时尽量准确，加95%的乙醇溶解进行稀释处理，达到标准刻度位置的同时需要进行摇匀处理，避免一定的误差出现。
2.3.2制备供试品溶液：用天平准确地称取葛根粉末0.4 g于100ML的锥形瓶中，加进95%乙醇60 mL;放在热水中进行加热处理;大约50min并在加热时及时进行振摇处理;时间结束后进行冷却处理;加乙醇补足到原刻度线位置;摇匀处理;静置一段时间使溶液澄清;吸取上清液2 mL左右导入到25 mL的量瓶中;加入适量的蒸馏水进行稀释;恢复原刻度线位置并作摇匀处理。
2.3.3最大吸收峰的确定：吸取对照品溶液和供试品溶液，吸取时需要注意两点，一是吸取需精准，二是吸取需适量。以2mL 95%乙醇加水稀释至20mL量瓶中作为主要的对照溶液，进行扫描处理，结果显示在250nm附近的时候有最大吸收强度。
2.3.4精密度分析：对黄酮对照品溶液进行精密吸取，在250nm的时候测定其吸收光照的程度，连续操作5次，RSD为0.1%，说明仪器具备良好的精密度。
2.3.5稳定性试验分析：吸取同一种供试品溶液，在制备60min（每间隔10min测量一次）时间内分别测定其吸收光照的程度，测得RSD在60分钟之内变化处于稳定的状态，因此可以说明此实验的稳定性良好，不会因此而出现一定的误差现象。
2.2.6重复性试验：用天平准确地称取同一样品的粉末各6份，每一份质量为0.4g，重复上述制备供试液的方法继续制此溶液，在250nm下测定其吸收光照的强度，在此位置RSD为1%左右，这一结果表面该实验的方法的重复性方面基本没有问题。
2.2.7加样回收率试验分析：取同样的葛根粉末各6份，每一份大约在0.1g左右，在每份样品中加入一定量的葛根素作为主要的对照样品。重复上述操作制备供试液，测定结果如表2所示。
2.4不同地区的葛根成分分析
通过检测测出不同地区葛根含量明细如下（图3）
三、讨论
对大豆苷、大豆苷元标准品溶液进行紫外全波长的扫面，再加上对样品溶液进行紫外全波长扫描，结果显示都是在248 nm处吸收程度比较好，因此通过实验分析出大豆苷、大豆苷元含量进行相关的测定是时选择测定波长为248 nm时效果是最明显的，因此这个数值可以被用来以后的测定和研究，可以节省一定的人力、物力和财力。葛根中的黄酮物质对乙醇比较容易吸收，通过实验的分析可以发现，当浓度为70%时，乙醇提取大豆苷、大豆苷元效果是比较好的，因此在进行测定的时候一般可以采用70%的乙醇来进行操作。另外当大豆苷的元峰与其它峰交互在一起时。经过试验选用甲醇～水按上述实验的操作步骤进行，使大豆苷，大豆苷元可以完全分离的状态，这样往往分离效果是比较明显，方便结果分析。
四、总结
本实验主要是根据葛根的多种成分进行详细地分析，对收集的不同地区的葛根样品进质量分析，结果表明，产地不同，葛根的质量上均存在一定的差异。因此在不断地研究中，对于药材的产地和不同的品种之间进行相应的研究，可以在一定程度上对药材的质量进行保证。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[s].一部，北 京：化学工业出版社，2005：233.
[2] 易红，杨华.葛根的品种产地和提取工艺研究进展 概况[J].中国实验方剂学杂志，2006（11）：60.
[3] 冀春茹，王浴铭，刘延泽，等.中药化学实验技术与实验 [M].郑州：河南科学技术出版社，1986：281.