【摘 要】
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兰州大尾羊是中国濒临灭绝的物种,通过体细胞培养和长期保存,在细胞水平上保存珍贵的种质资源。采用胰蛋白酶消化分离并培养原代肾细胞和睾丸细胞,并通过差速消化和差速贴壁
【机 构】
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甘肃省动物细胞工程技术研究中心,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室
【基金项目】
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国家科技基础平台项目(2005DKA21101-29), 兰州市科技计划项目(2006-2-59)
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兰州大尾羊是中国濒临灭绝的物种,通过体细胞培养和长期保存,在细胞水平上保存珍贵的种质资源。采用胰蛋白酶消化分离并培养原代肾细胞和睾丸细胞,并通过差速消化和差速贴壁法纯化成纤维细胞并用液氮保存,细胞复苏后进行活力、形态、生长特性、微生物污染和染色体等检查,保存兰州大尾羊26个个体的肾细胞和9个个体睾丸细胞,保存细胞生长良好,均呈成纤维型,平均复苏活力为98.6%和95.2%,生长曲线均呈"S"型,最大增殖密度分别为3.15×105 mL-1和2.92×105 mL-1,倍增时间分别为29
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