论文部分内容阅读
目的构建小鼠H3K9甲基转移酶Suv39h1基因慢病表达毒载体。方法设计并合成带有Kpnl和Xmal酶切位点的引物,以携带Suv39h1 cDNA的PCMV—SPORT6载体为模板扩增目的基因,将其与Lenti—eGFP—Neo载体双酶切,T4连接酶连接,构建成PLenti—eGFP—Suv39h1重组载体,转化感受态细胞DH5α,PCR筛选阳性克隆质粒,酶切与测序鉴定正确后,将慢病毒四质粒系统共转染293T细胞,包装及效价测定。以感染复数(MOI值)为10和30的慢病毒颗粒感染293T细胞,RT—PCR