【摘 要】
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目的:研究12-脂氧合酶(12-lipoxygenase,12-LOX)在人肝癌细胞株SMMC-7721中的表达,以及选择性12-LOX抑制剂黄芩素对人肝癌细胞SMMC-7721生长、凋亡的影响。方法:采用免疫细胞
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目的:研究12-脂氧合酶(12-lipoxygenase,12-LOX)在人肝癌细胞株SMMC-7721中的表达,以及选择性12-LOX抑制剂黄芩素对人肝癌细胞SMMC-7721生长、凋亡的影响。方法:采用免疫细胞化学染色及RT-PCR检测12-LOX的蛋白质和mRNA在SMMC-7721中的表达。应用MTT、流式细胞术及TUNEL检测细胞生长及凋亡。蛋白印迹法检测分析Caspase-3,Bcl-2,Bax,phospho-ERK1/2,ERK1/2和β-actin蛋白质的表达。结果:免疫细胞化学技术显示12-LOX蛋白表达于SMMC-7721细胞质。RT-PCR检测到黄芩素呈浓度-时间依赖性地抑制12-LOX mRNA表达。采用黄芩素不同浓度或不同时间段干预细胞SMMC-7721,MTT法检测细胞增殖呈剂量、时间依赖性的下降。原位末端转移酶标记技术及流式细胞仪分析证实12-LOX抑制剂诱导细胞凋亡。蛋白印迹法检测显示,黄芩素干预后,Bcl-2蛋白表达明显下降和Bax蛋白轻微上升,细胞凋亡蛋白酶-3活性水平与黄芩素浓度正相关,黄芩素对细胞凋亡相关蛋白的影响被12(S)-HETE逆转,12(S)-HETE可能激活ERK1/2磷酸化。结论:人肝癌细胞株SMMC-7721存在12-LOX的表达,12-LOX抑制剂黄芩素可抑制细胞生长和诱导细胞凋亡。
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