青海地方核桃ISSR-PCR反应体系建立及优化

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以青海地方核桃嫩叶为试材,采用正交设计对ISSR-PCR反应体系中主要影响因子进行了优化,以建立反应的最佳条件。结果表明:青海地方核桃20μL ISSR-PCR最佳反应体系为0.45 mmol·L~(-1) dNTP、0.5μmol·L~(-1)引物、1.75 mmol·L~(-1) Mg~(2+)、0.75 U Taq酶和80ng DNA。 Taking Qinghai local walnut leaves as test materials, orthogonal design was used to optimize the main influencing factors in ISSR-PCR reaction system to establish the optimal reaction conditions. The results showed that the best reaction system of 20 μL ISSR-PCR was 0.45 mmol·L -1 dNTP, 0.5 μmol·L -1 primer, 1.75 mmol·L -1 Mg 2 +), 0.75 U Taq enzyme and 80 ng DNA.
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