【摘 要】
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研究了根癌农杆菌LBA 4404和C58C1生长的培养基类型、菌株生长状态、转化溶液、质粒与感受态细胞共放置时间、质粒加入量、液氮速冻时间及热激条件对质粒P rokⅡ转化的影响。
【机 构】
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西北农林科技大学农学院; 中国科学院上海植物生理研究所; 西北农林科技大学农学院 陕西杨凌712100; 陕西杨凌712100; 上海200032;
【出 处】
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西北农林科技大学学报(自然科学版)
【基金项目】
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陕西省科技攻关项目(2003K03-G1-04)
论文部分内容阅读
研究了根癌农杆菌LBA 4404和C58C1生长的培养基类型、菌株生长状态、转化溶液、质粒与感受态细胞共放置时间、质粒加入量、液氮速冻时间及热激条件对质粒P rokⅡ转化的影响。结果表明,以70 mm o/L C aC l2作为转化溶液,YEB培养基制备的、OD600为0.5的LBA 4404感受态细胞与10 ng质粒DNA,于0℃共放置30m in,液氮速冻5 m in,37℃热激5 m in时转化率最高,达1.40×105μg-1;以70 mm o/L C aC l2作为转化溶液,YEB培养基制备的、OD600为0.5~0.6的C58C1感受态细胞与20 ng质粒DNA,于0℃共放置10 m in,液氮速冻1 m in,37℃热激1 m in时转化率最高,达1.33×105μ-g 1。
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