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目的:构建人膀胱癌B12211细胞表达型cDNA文库,为肿瘤抗原的筛选奠定工作基础。方法:提取B12211细胞总RNA.分离mRNA,反转录合成双链cDNA,削平cDNA末端,连接跏砌适配子,磷酸化踟RI适配子5’端,XhoI酶切,Sephacryl-S400柱除去小于400bpcDNA片段,与XZAP表达载体连接,包装蛋白包装后建成cDNA文库;取出1m倍比稀释感染大肠杆菌XL1-Blue—MRF’,测定文库大小、重组率;随机挑取7个噬斑,在ExAssist辅助性噬茵体的作用下,释放出PBK—CMV噬茵