【摘 要】
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目的:在肿瘤抑制基因PTEN缺失的小鼠胚胎成纤维细胞Pten-/-MEF241细胞中,研究多效生长因子(pleiotrophin,Ptn)对细胞增殖的影响.方法:设计并合成可编码针对小鼠Ptn基因的小干
【机 构】
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军事医学科学院放射与辐射医学研究所,重庆医科大学病理学教研室
【基金项目】
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北京市自然科学基金;国家自然科学基金
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目的:在肿瘤抑制基因PTEN缺失的小鼠胚胎成纤维细胞Pten-/-MEF241细胞中,研究多效生长因子(pleiotrophin,Ptn)对细胞增殖的影响.方法:设计并合成可编码针对小鼠Ptn基因的小干扰RNA (siRNA)寡核苷酸,构建至pSilencerTM3.1-H1载体,将载体转染进Pten-/-MEF241细胞中,获得稳定表达细胞克隆株,通过Northern印迹检测Ptn基因表达被抑制的情况,根据细胞生长曲线检测沉默Ptn基因对Pten-/-MEF241细胞生长的影响.结果:获得的稳定克隆株中,与对照细胞相比,Ptn基因的表达在转染Ptn siRNA-B的3株细胞中均得到了有效的抑制,而在转染Ptn siRNA-C的2株细胞中抑制效果较差.生长曲线结果显示,在Pten-/-MEF241细胞中,沉默Ptn基因能够减缓Pten-/-MEF241细胞的生长速度.结论:本研究获得了可有效抑制Ptn基因的小干扰RNA,证明沉默Ptn基因可抑制PTEN 基因缺失细胞的增殖,提示Ptn可作为治疗具有PTEN基因突变的肿瘤的药物靶标.
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