【摘 要】
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目的:探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）α/β-水解酶结构域蛋白11的反义链1（α/β-hydrolase domain containing protein 11-antisense strand 1,ABHD11-AS1）在Erastin诱导的胰腺癌细胞铁死亡中的作用及其潜在机制。方法:通过GEPIA平台分析ABHD11-AS1在胰腺癌中表达和患者预后
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（82072754）； 江苏省卫生健康委科技项目（M2020011）； 江苏省社会发展基金资助项目（BE2018689）； 镇江市社会发展项目（SH2018033）；
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目的:探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）α/β-水解酶结构域蛋白11的反义链1（α/β-hydrolase domain containing protein 11-antisense strand 1,ABHD11-AS1）在Erastin诱导的胰腺癌细胞铁死亡中的作用及其潜在机制。方法:通过GEPIA平台分析ABHD11-AS1在胰腺癌中表达和患者预后。采用荧光实时定量PCR（qRT-PCR）检测人胰腺癌PANC1、MIApaca-2和PaT u8988细胞中ABHD11-AS1表达,CCK8法计算Erastin半数抑制浓度(IC50)。在PANC1细胞中过表达ABHD11-AS1,分别转染pcD NA3.1、pcDNA3.1-ABHD11-AS1质粒;在PaT u8988细胞中干扰ABHD11-AS1表达,分别转染siC ontrol、siRNA1、siRNA2,qRT-PCR检测转染效率,分别予以对照（0μmol/L Erastin）、Erastin(IC50浓度)处理,CCK8法检测细胞活性,ELISA法检测丙二醛和还原性谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量;另在pcD NA3.1-ABHD11-AS1和siR NA1组加入Erastin的同时加入铁死亡挽救剂Ferrostatin-1,坏死挽救剂Necrostatin-1或凋亡挽救剂Z-VAD-FMK,CCK8法检测细胞活性;免疫印迹法检测5组胰腺癌细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4,GPX4）、雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）蛋白以及磷酸化mTOR（p-mTOR）表达水平。结果:胰腺癌组织中ABHD11-AS1表达水平明显高于癌旁组织,高表达ABHD11-AS1组患者预后较差（P＜0.05）。ABHD11-AS1相对表达量由低到高依次是人胰腺癌PANC1、MIApaca-2和PaT u8988细胞,Erasin IC50趋势与ABHD11-AS1表达量相同,依次是2.245、11.760、17.120μmol/L。与pcD NA3.1组相比,pcDNA3.1-ABHD11-AS1组细胞活性及GSH含量明显增高,而丙二醛含量明显降低（P＜0.05）;与siC ontrol组相比,siRNA1组和siR NA2组细胞活性及GSH含量明显降低,丙二醛含量明显增高（P均＜0.05）。仅Ferrostatin-1可以挽救pcD NA3.1-ABHD11-AS1和siR NA1组细胞活性（P＜0.05）。过表达ABHD11-AS1可促进mTOR活化,增强GPX4表达（P＜0.05）;而干扰ABHD11-AS1则相反。结论:LncR NA ABHD11-AS1可通过活化mTOR促进GPX4表达,从而促进胰腺癌细胞铁死亡抵抗。
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