白细胞介素-1β(IL-1β)是增生性玻璃体视网膜病变(PVR)早期释放的重要炎性因子，研究证实姜黄素能抑制IL-1β诱导的兔视网膜色素上皮(RPE)细胞的增生，但其是否能够对PVR发挥抗炎作用尚不清楚。
目的观察姜黄素对IL-1β诱导的兔RPE细胞移行的影响，探讨姜黄素对IL-1β诱导的RPE细胞中炎性因子表达的影响。
方法采用对数生长期原代培养的第4代兔RPE细胞进行实验，在无血清DMEM培养基中分别添加0、0.1、1.0和10.0 μg/L的IL-1β作用于细胞24 h，分别采用Western blot和逆转录PCR法检测细胞中环氧合酶-2(COX-2)蛋白和mRNA的表达以筛选IL-1β最佳质量浓度。将培养的RPE细胞分为IL-1β组和姜黄素＋IL-1β组，分别在无血清培养基中添加1.0 μg/L IL-1β和1.0 μg/L IL-1β联合10 μg/ml姜黄素作用于细胞24、48和72 h，仅用无血清培养基培养的细胞作为对照组。培养的细胞行苏木精－伊红染色，于光学显微镜下计算进入损伤区的细胞数，比较各组细胞的移行能力；分别采用Western blot法和逆转录PCR法检测各组RPE细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量，采用Western blot法检测并比较各组细胞中核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白和核因子κB抑制蛋白-α(IκB-α)的相对表达量；采用免疫化学染色法检测NF-κBp65、IκB-α和COX-2在各组RPE细胞中的表达和定位。
结果初分离的兔RPE细胞呈球形，细胞中可见大量黑色素颗粒；第4代细胞色素颗粒明显减少，接近融合的细胞形态为长梭形，呈拉网状分布。免疫细胞化学染色法结果显示，细胞角蛋白(AE1/AE3)在细胞质呈阳性表达。对照组在培养24、48和72 h移行的细胞数分别为(31.93±1.21)、(36.27±2.50)和(38.33±2.40)个，IL-1β组分别为(45.73±2.30)、(71.13±1.92)和(80.60±1.71)个，而姜黄素＋IL-1β组分别为(13.13±2.20)、(14.93±1.10)和(12.60±1.51)个，各时间点IL-1β组细胞移行细胞数均明显高于对照组，而姜黄素＋IL-1β组移行细胞数均明显低于对照组和IL-1β组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。IL-1β质量浓度为1.0 μg/L时，RPE细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量达峰，以1.0 μg/L IL-1β的剂量进行后续实验。细胞培养后24、48和72 h，姜黄素＋IL-1β组细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量均明显低于IL-1β组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。IL-1β作用于细胞后48 h，细胞中NF-κBp65蛋白的相对表达量最高，与IL-1β组相比，各时间点姜黄素＋IL-1β组细胞中NF-κBp65蛋白相对表达量降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)。IL-1β组药物作用于细胞后48 h细胞中IκB-α降至最低，各时间点姜黄素＋IL-1β组细胞中IκB-α值均明显高于IL-1β组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。免疫细胞染色结果显示，IL-1β组RPE细胞的细胞核及细胞质中NF-κBp65呈强阳性表达，对照组表达较弱，姜黄素＋IL-1β组细胞中NF-κBp65的表达强度较IL-1β组明显降低；与对照组相比，IL-1β组细胞的细胞质中IκB-α表达强度明显减弱，而COX-2表达明显增强；与IL-1β组比较，姜黄素＋IL-1β组细胞中IκB-α表达明显增强，而COX-2表达明显减弱。
结论姜黄素可抑制IL-1β引起的兔RPE细胞的移行，IL-1β通过激活NF-κB信号通路刺激细胞中COX-2的表达，姜黄素可通过阻断这一途径而抑制炎性因子的表达，从而发挥抗炎作用。