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摘要：目的：研究UCP-2基因多态对椎管内麻醉剖宫产患者寒战反应的影响以及探讨剖宫产患者围术期寒战的危险因素。方法：选择腰硬联合麻醉下行剖宫产手术的产科患者200例，记录患者麻醉手术过程中生命体征、手术室温度及术中寒战发生情况，应用PCR及PCR-RFLP对所有患者UCP-2基因启动子-866A/G进行基因分型。结果：1.在本组病例中UCP-2基因启动子-866AA型、AG型和GG型患者分别占30.5%、51.5%和18%，寒战发生率分别为73.8%、72.5%和47.2%，差异有统计学意义（P=0.024<0.05）。2.手术室环境温度低于23℃的寒战发生率为83.6%，不低于23℃的寒战发生率为61.4%，两者比较差异有统计学意义（P=0.009<0.05）；麻醉阻滞平面、低血压和手术时间长短对寒战发生的影响没有统计学意义。结论：UCP-2基因启动子-866G/A多态性及手术室环境温度与剖宫产患者围术期寒战发生率相关。
关键词：剖宫产；寒战；UCP-2；温度
国家自然基金项目（81302852）
剖宫产手术是临床常见的择期及急诊手术之一，近年来，椎管内麻醉下剖宫产术中术后寒战反应越来越引起人们的重视，其能使产妇不适感增强、耗氧量增加，甚至导致胎儿宫内窘迫或影响手术操作[1，2].
解偶联蛋白（UCPs）在调节非寒战产热和维持体温平衡中具有重要作用，而剖宫产患者围术期寒战的主要原因是热量的散失与环境温度降低，因此本研究想探讨UCPs与剖宫产患者围术期寒战的关系；目前有诸多的研究显示UCPs基因多态对其表达和功能具有重要影响[3，4]， 我们在本研究中观察了UCP-2基因启动子-866 A-G基因多态对腰麻下剖宫产患者寒战反应的影响.
资料与方法
一般资料择期或急诊腰硬联合麻醉下行剖宫产手术的产妇共200例， ASA分级I～Ⅱ级。年龄：22岁—35岁。孕妇既往无先天性心肺疾病，无椎管内麻醉禁忌症，无高血压或妊娠期高血压，无甲状腺功能亢进症、糖尿病等内分泌疾病。
麻醉方法 所有患者均无术前用药。患者进入手术室后监测心电、血压、脉搏和指脉搏血氧饱和度，开放外周静脉通路，鼻导管吸氧（流量：2L/min），麻醉前静脉输注4%琥珀酰明胶6-8ml/Kg，之后以醋酸复方电解质溶液500ml静滴维持。右侧卧位选择L2-3间隙行硬膜外穿刺，蛛网膜下腔用药为2ml0.75%罗哌卡因+1ml10%葡萄糖，留置硬膜外导管以备术中追加局麻药，硬脑膜外腔用药为0.75%罗哌卡因和（或）2%利多卡因。
观察指标 患者入手术室后用AgilentV24C监护仪连续监测生命体征，应用室温温度计记录手术室温度，记录术中输液量、输血量、出血量、尿量等；记录手术时间，术中用药名称和剂量；麻醉平面、寒战发生情况。
实验方法采用蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取DNA组（E.Z.N.A.TM？SQ？Blood？DNA？Kit试剂盒？（D5032-01）由美国OMEGA公司提供）：运用聚合酶链式反应（PCR）对UCP-2启动子基因-866A-G分型. UCP-2启动子基因上游引物：5'-CACGCTGCTTCTGCCAGGAC-3'下游引物： 5'-AGGCGTCAGGAGATGGACCG-3'. PCR反应条件：首先在95℃变性8分钟，然后95℃变性1分钟，65℃ 退火1分钟，72℃ 延伸1分钟，共35个循环，最后72℃延伸7分。酶切后产物在0.8%琼脂糖凝胶中电泳（恒压80V，电泳缓冲液1×TBE）30min后，将凝胶移至成像系统下进行观察。
统计学处理 所有数据都通过SPSS.17.0处理，计量资料应用均数±标准差表示；不同类型产妇寒战发生率的比较应用卡方检验；有统计学意义的因素与寒战反应的独立因素分析采用单因素相关分析；卡方检验有统计学意义的因素与寒战反应的分析应用Logistic回归分析（自变量引入标准为α=0.10，排除标准为α=0.15），多因素分析检验标准：P<0.05认为有统计学意义。
结果
麻醉阻滞平面、低血压、手术时间长短对寒战发生的影响没有统计学意义；手术室温度、UCP-2基因启动子-866G/A多态性对寒战发生的影响有统计学意义（表1）。
a：急诊与非急诊比较P<0.05；b室温比较P<0.05；c：UCP-2基因型比较P<0.05
讨论
寒战是机体对应急事件的一种防御机能，使机体氧耗增加，二氧化碳生成量增加，每分钟通气量增加，心排量增加，血糖升高，心率、心律也出现相应变化，耗氧量增加，从而加重心肺负荷， 可导致危重患者心肺功能衰竭[5，6]。麻醉过程中，体热的再分布是造成寒战的重要因素。
线粒体内膜跨膜蛋白-解偶联蛋白（Uncoupling proteins，UCPs）可以介导线粒体内膜H+内流形成“质子渗漏”，使质子梯度消失，质子传递的能量绕过ATP合成而以热量形式散失，在非寒战产热中具有重要作用。UCP-2基因启动子-866A-G基因突变后，UCP-2的功能发生了变化，影响机体能量代谢、贮备以及热量的产生，进而对机体在麻醉手术过程中御寒和产热产生影响，当然其确切的机制尚需要更多的研究来探讨。
参考文献：
[1]Roy J D， Girard M，Drolet P. Intrathecal meperidine decreases shivering during cesarean delivery under spinal anesthesia[J]. Anesth Analg， 2004， 98（1）：230-234， table of contents.
[2]Kahara T， Takamura T， Hayakawa T， et al. Prediction of exercise-mediated changes in metabolic markers by gene polymorphism[J]. Diabetes Res Clin Pract， 2002， 57（2）：105-110.
[3] De Witte J，Sessler D I. Perioperative shivering： physiology and pharmacology[J]. Anesthesiology， 2002， 96（2）：467-484.
[4] Chun D H， Kil H K， Kim H J， et al. Intrathecal meperidine reduces intraoperative shivering during transurethral prostatectomy in elderly patients[J]. Korean J Anesthesiol， 2010， 59（6）：389-393.
关键词：剖宫产；寒战；UCP-2；温度
国家自然基金项目（81302852）
剖宫产手术是临床常见的择期及急诊手术之一，近年来，椎管内麻醉下剖宫产术中术后寒战反应越来越引起人们的重视，其能使产妇不适感增强、耗氧量增加，甚至导致胎儿宫内窘迫或影响手术操作[1，2].
解偶联蛋白（UCPs）在调节非寒战产热和维持体温平衡中具有重要作用，而剖宫产患者围术期寒战的主要原因是热量的散失与环境温度降低，因此本研究想探讨UCPs与剖宫产患者围术期寒战的关系；目前有诸多的研究显示UCPs基因多态对其表达和功能具有重要影响[3，4]， 我们在本研究中观察了UCP-2基因启动子-866 A-G基因多态对腰麻下剖宫产患者寒战反应的影响.
资料与方法
一般资料择期或急诊腰硬联合麻醉下行剖宫产手术的产妇共200例， ASA分级I～Ⅱ级。年龄：22岁—35岁。孕妇既往无先天性心肺疾病，无椎管内麻醉禁忌症，无高血压或妊娠期高血压，无甲状腺功能亢进症、糖尿病等内分泌疾病。
麻醉方法 所有患者均无术前用药。患者进入手术室后监测心电、血压、脉搏和指脉搏血氧饱和度，开放外周静脉通路，鼻导管吸氧（流量：2L/min），麻醉前静脉输注4%琥珀酰明胶6-8ml/Kg，之后以醋酸复方电解质溶液500ml静滴维持。右侧卧位选择L2-3间隙行硬膜外穿刺，蛛网膜下腔用药为2ml0.75%罗哌卡因+1ml10%葡萄糖，留置硬膜外导管以备术中追加局麻药，硬脑膜外腔用药为0.75%罗哌卡因和（或）2%利多卡因。
观察指标 患者入手术室后用AgilentV24C监护仪连续监测生命体征，应用室温温度计记录手术室温度，记录术中输液量、输血量、出血量、尿量等；记录手术时间，术中用药名称和剂量；麻醉平面、寒战发生情况。
实验方法采用蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取DNA组（E.Z.N.A.TM？SQ？Blood？DNA？Kit试剂盒？（D5032-01）由美国OMEGA公司提供）：运用聚合酶链式反应（PCR）对UCP-2启动子基因-866A-G分型. UCP-2启动子基因上游引物：5'-CACGCTGCTTCTGCCAGGAC-3'下游引物： 5'-AGGCGTCAGGAGATGGACCG-3'. PCR反应条件：首先在95℃变性8分钟，然后95℃变性1分钟，65℃ 退火1分钟，72℃ 延伸1分钟，共35个循环，最后72℃延伸7分。酶切后产物在0.8%琼脂糖凝胶中电泳（恒压80V，电泳缓冲液1×TBE）30min后，将凝胶移至成像系统下进行观察。
统计学处理 所有数据都通过SPSS.17.0处理，计量资料应用均数±标准差表示；不同类型产妇寒战发生率的比较应用卡方检验；有统计学意义的因素与寒战反应的独立因素分析采用单因素相关分析；卡方检验有统计学意义的因素与寒战反应的分析应用Logistic回归分析（自变量引入标准为α=0.10，排除标准为α=0.15），多因素分析检验标准：P<0.05认为有统计学意义。
结果
麻醉阻滞平面、低血压、手术时间长短对寒战发生的影响没有统计学意义；手术室温度、UCP-2基因启动子-866G/A多态性对寒战发生的影响有统计学意义（表1）。
a：急诊与非急诊比较P<0.05；b室温比较P<0.05；c：UCP-2基因型比较P<0.05
讨论
寒战是机体对应急事件的一种防御机能，使机体氧耗增加，二氧化碳生成量增加，每分钟通气量增加，心排量增加，血糖升高，心率、心律也出现相应变化，耗氧量增加，从而加重心肺负荷， 可导致危重患者心肺功能衰竭[5，6]。麻醉过程中，体热的再分布是造成寒战的重要因素。
线粒体内膜跨膜蛋白-解偶联蛋白（Uncoupling proteins，UCPs）可以介导线粒体内膜H+内流形成“质子渗漏”，使质子梯度消失，质子传递的能量绕过ATP合成而以热量形式散失，在非寒战产热中具有重要作用。UCP-2基因启动子-866A-G基因突变后，UCP-2的功能发生了变化，影响机体能量代谢、贮备以及热量的产生，进而对机体在麻醉手术过程中御寒和产热产生影响，当然其确切的机制尚需要更多的研究来探讨。
参考文献：
[1]Roy J D， Girard M，Drolet P. Intrathecal meperidine decreases shivering during cesarean delivery under spinal anesthesia[J]. Anesth Analg， 2004， 98（1）：230-234， table of contents.
[2]Kahara T， Takamura T， Hayakawa T， et al. Prediction of exercise-mediated changes in metabolic markers by gene polymorphism[J]. Diabetes Res Clin Pract， 2002， 57（2）：105-110.
[3] De Witte J，Sessler D I. Perioperative shivering： physiology and pharmacology[J]. Anesthesiology， 2002， 96（2）：467-484.
[4] Chun D H， Kil H K， Kim H J， et al. Intrathecal meperidine reduces intraoperative shivering during transurethral prostatectomy in elderly patients[J]. Korean J Anesthesiol， 2010， 59（6）：389-393.