【摘 要】
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从大球盖菇Sr-01菌株液体发酵液中分离漆酶,研究温度、p H和金属离子对酶活的影响。采用硫酸铵分级沉淀、Q-Sepharose阴离子交换层析和Superdex 200凝胶过滤层析对大球盖菇漆
【机 构】
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天津市林业果树研究所,天津农学院食品科学与生物工程学院
【基金项目】
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天津市农业科学院院长基金(16009);天津市科技计划项目(16ZXZYNC00170);天津市科技计划项目(17ZXBFNC00160);天津市蔬菜现代农业产业技术体系创新团队(ITTVRS2017008)
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从大球盖菇Sr-01菌株液体发酵液中分离漆酶,研究温度、p H和金属离子对酶活的影响。采用硫酸铵分级沉淀、Q-Sepharose阴离子交换层析和Superdex 200凝胶过滤层析对大球盖菇漆酶进行分离纯化。以ABTS[2,2-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)]为底物,分光光度法测定酶活。结果表明,纯化后的漆酶比活力为152.79 U/mg,回收率为35.8%。SDSPAGE显示该漆酶为单体蛋白,相对分子质量约40 k D。该漆酶的最适反应温度和p H分别为35℃和4.0,Mg2+、Cu2+对酶活有激活作用,Fe2+、Cd2+、Hg2+则有显著抑制作用。在最优反应条件下,纯化后的漆酶比活力可达222.93 U/mg。
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