【摘 要】
：
目的:构建我室保存的一株西尼罗病毒引进毒株(CH-01)基因组全长cDNA的亚克隆,为进一步构建该毒株的感染性全长cDNA克隆奠定基础.方法:根据CH-01病毒株基因组序列中含有的特异
【机 构】
：
军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室
论文部分内容阅读
目的:构建我室保存的一株西尼罗病毒引进毒株(CH-01)基因组全长cDNA的亚克隆,为进一步构建该毒株的感染性全长cDNA克隆奠定基础.方法:根据CH-01病毒株基因组序列中含有的特异性酶切位点,利用DNAstar及Oligo6软件设计5对引物.以感染细胞中的病毒RNA为模板,通过RT-PCR扩增出覆盖病毒基因组全长的5个cDNA片段,并分别将其克隆至pGEM(R) -T easy载体,通过片段间共有的酶切位点进行连接,最终获得基因组5′和3′半分子,并分别通过序列测定加以鉴定.结果与结论:已构建出西尼罗病毒CH-01株基因组的5′和3′半分子,经酶切鉴定和序列测定表明所获得的cDNA克隆为该株病毒的特异性序列.
其他文献
目的:探讨无创正压通气对煤工尘肺稳定期患者的康复作用。方法:采用自身及组间对照法,测定煤工尘肺患者使用BiPAP呼吸机辅助通气3周前后的肺通气功能、动脉血气分析、生存质
目的证明放线菌噬菌体重组酶Sre在大肠杆菌细胞内介导高效的位点特异性重组. 方法在大肠杆菌内构建分子内重组分析系统.质粒pBZP含有方向相同的attB和attP位点,分别位于lacZ
目的研究佐米曲普坦片在中国健康志愿者体内的药代动力学及相对生物利用度.方法用双周期随机交叉自身对照方法,18名健康男性志愿者单剂量口服试验制剂或参比制剂各5 mg,用高
目的探讨急性胰腺炎后胰腺修复的机制。方法实验所用动物为NIH Swiss小鼠,分两组,分别是盐水对照组、急性胰腺炎组(AP组)。急性胰腺炎诱导采用蛙皮素腹腔注射,用常规病理评价
目的探讨大鼠角膜碱烧伤后不同时期ICAM-1、VCAM-1和CD44在角膜的表达和分布,了解与角膜碱烧伤病理损害的关系,完善角膜碱烧伤免疫机制的研究.方法 Wistar大鼠80只,制备角膜
目的探讨促肝细胞生长素治疗婴儿肝炎综合征的临床疗效及安全性.方法选择2002年3月～2003年2月住院的婴儿肝炎综合征患儿61例,静脉滴注促肝细胞生长素,进行前瞻性研究;选取2001
目的:试图观察髓鞘蛋白脂质蛋白多肽(proteolipidprotein,PLP)两种不同肽段PLP193～151和PLP178～191抗原决定簇对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomye
DAF作为一种补体调节蛋白可抑制补体两条途径的激活和NK细胞的杀伤作用,参与单核细胞、T细胞的活化及微生物的粘附作用和细胞凋亡。它的诸多功能决定其参与肿瘤的生长和转移
目的:分析原发性心脏非粘液瘤性肿瘤的影像学特征,评估几种常用的影像学诊断方法的主要优势及局限性。方法:搜集1979年1月至2004年3月来有完整临床、影像学及病理资料证实的
目的研究甲钴胺片剂在健康人体内的药代动力学,并比较2种甲钴胺片剂的生物等效性.方法20名健康男性受试者随机交叉口服单剂量试验和参比甲钴胺片剂1500μg后,用微粒子捕捉酶