【摘 要】
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利用不同拓扑学结构的质粒,分别转化E.coli感受态细胞、转染SK6-6细胞和免疫小鼠,比较了不同拓扑学结构质粒对转化效率、转染率和对免疫应答水平的影响.结果显示,超螺旋占50%
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);
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利用不同拓扑学结构的质粒,分别转化E.coli感受态细胞、转染SK6-6细胞和免疫小鼠,比较了不同拓扑学结构质粒对转化效率、转染率和对免疫应答水平的影响.结果显示,超螺旋占50%比例的猪瘟病毒E2基因表达质粒pCDSW转化E.coli感受态细胞的效率比开环的pCDSW高8倍,超螺旋比例占80%的pVAXE2IL-2质粒比醇切线性化质粒转化率高22倍;以荧光蛋白基因为报告基因,超螺旋比例占80%的荧光蛋白真核表达质粒转染真核细胞的效率是线性化质粒的12倍;以猪瘟病毒主要保护性抗原E2基因表达质粒,分别制备成超螺旋和开环形式占优势的质粒,免疫昆明鼠,抗体检测结果显示,超螺旋比例高的基因疫苗免疫效果明显好于开环质粒的基因疫苗.
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