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【摘 要】 目的：探究沙参麦冬汤加味对被动吸烟小鼠抗氧化能力的影响。方法：将64只大鼠随机平均分为四组，采用自制熏烟装置，依据文献[1、2]建立被动吸烟呼吸系统损伤模型，治疗组在造模同时给药，造模完成后观察其肺组织病理学变化，测定肺组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）的活性、丙二醛（MDA）的含量。结果：沙参麦冬汤加味可明显改善小鼠肺组织病理学病变，提高小鼠肺组织中SOD活性，降低MDA的含量。结论：沙参麦冬汤加味对小鼠抗氧化能力具有一定的保护作用。
【关键词】 沙参麦冬汤 抗氧化 SOD MDA
被动吸烟又称环境烟草烟（ETS），是当今社会倍受重视的危害人体健康、污染公共卫生的主要问题之一。呼吸道是其侵袭人体的首要部位，有毒物质短时间内就能造成上呼吸道的损伤，烟雾刺激可使肺功能和结构遭到破坏，造成多种呼吸系统疾病，减弱机体抗氧化能力。沙参麦冬汤出自清代温病学家吴鞠通的《温病条辨》，是润养肺胃，清热生津之常用方剂，临床常用于多种呼吸道疾病的治疗。本实验拟通过建立二手烟小鼠模型，初步探讨沙参麦冬汤加味对被动吸烟小鼠抗氧化能力的影响。
1 材料与实施方法
1.1 实验动物与分组
四周龄昆明小鼠，雄性64只，体重 20±3g购于山东鲁抗动物药业有限公司，生产许可证号：scxk（鲁）2013-0001。小鼠随机分为4组，即空白对照组、模型组、预防干预高剂量组、预防干预低剂量组，每组16只。
1.2 药品试剂
①沙参麥冬汤加味
组成及剂量：北沙参20g、麦冬20g、花粉15g、玉竹15g、扁豆20g、桑叶10g、炙甘草6g、黄芪20g均为道地药材，采用免煎颗粒，购于山东中医药大学中鲁医院。
②烟草：哈德门，山东中烟工业公司出品生产，焦油量12mg。生产批号：1H4B180
③SOD活性测定试剂盒，生产批号：2014229；MDA含量测定试剂盒，生产批号：2014229，均购于南京建成生物工程研究所。
1.3 造模方法
参照文献[1、2]，自制熏烟装置，实验第一天起予模型组、预高组、预低组实验小鼠被动吸烟45min，分三次各15min进行，一次3支，实验过程中每隔五分钟打开通风孔通气10s。
1.4 给药周期及剂量：
造模当日开始给药，预高组使用1.5g/ml浓度的药液，
以0.28ml/10g体重灌胃；预低组使用浓度为1g/ml的药液，以0.21ml/10g体重灌胃；空白组和模型组以0.21ml/10g体重用生理盐水灌胃，各组操作均连续进行20天。
1.5 指标及观测方法：
①每天观察小鼠一般情况，五天测量一次小鼠体重。
②实验结束摘取小鼠肺脏由山东省中医院病理科制作常规HE染色病理切片。
③严格依照试剂盒说明书所示测小鼠肺组织匀浆SOD活性、MDA的含量。
1.6 统计学处理方法：
采用SPSS 19.0统计软件进行单因素方差分析和LSD多重比较，实验数据用平均数±标准差表示（x±SD）。
2 结果
2.1 病理学观察
空白组小鼠肺组织结构完整，气道壁、上皮细胞完整，细胞排列整齐；模型组小鼠肺间隔结缔组织增厚，大多数肺泡隔弹性纤维破坏，形成大空泡，伴有明显的炎性细胞侵润，各类气管均受损，出现管壁不全、平滑肌断裂、上皮细胞排列稀松、脱落现象；预高组小鼠部分肺泡融合形成空泡，细支气管上皮细胞缺损，程度较轻，可见少量炎性细胞存在；预低组肺组织较预高组完整，肺泡空洞较小，细支气管上皮细胞排列较为完整。
2.2 组间SOD活性及MDA含量的比较（n=16）
3 讨论与结论
烟草等混合烟雾的吸入通过使肺脏组织自由基代谢紊乱，发生较强的脂质过氧化反应，从而明显损害肺脏组织的抗氧化系统[3]，对正常小鼠SOD活性、MDA含量的影响是显著的（P<0.01），因而进行抗氧化治疗减轻被动吸烟对肺部的损伤十分重要的。现代研究也表明，沙参麦冬汤对羟基自由基或超氧自由基具有抑制和清除作用[4、5、6]，过氧化物终产物丙二醛的生成具有明显抑制作用[7]。SOD是生物体内重要的抗氧化酶，能对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害，并及时修复受损细胞，沙参麦冬汤加味能提高被动吸烟小鼠SOD活性（P<0.05），改善被动吸烟小鼠氧化与抗氧化系统失衡的状态。MDA是生物体内自由基作用于脂质发生过氧化反应的氧化终产物，对肺组织中多种生物膜结构有损害作用，并且具有细胞毒性，沙参麦冬汤加味能降低被动吸烟小鼠MDA含量（P<0.05），减弱脂质过氧化。不同组间指标的对比均具有统计学意义，说明沙参麦冬汤加味对被动吸烟小鼠抗氧化能力有一定保护作用。
参考文献
[1]都本业，翁心植.关于被动吸烟危害的实验研究[J].中华结核和呼吸杂志，1991（2）：76-78.
[2]张大鹏，胡隆大，李辟.实验性被动吸烟小鼠的呼吸道病理形态学观察[J]中华结合呼吸杂志，1987，10（4）：224—225.
[3]李静，李彬彬，尹磊，陈会良，刘德义. 沙参麦冬汤对慢支模型大鼠肺脏抗氧化能力及其组织结构的影响[J]. 安徽科技学院学报，2013，27（3）6-10.
[4]李建刚，李庆典.沙参多糖对自由基的清除作用[J].中国酿造，2011（3）：66-68.
[5]刘榴，张白嘉.麦冬及有效部位药理作用研究进展[J].四川中医，2010，28（12）：39-41.
[6]姜玉兰，朴惠善，李镐.桑叶抗氧化活性成分的研究[J].中药材，2008，31（5）：729-731.
[7]谢子任.甘草药理活性的研究[J].中国实用医药，2009，4（7）：232-233.
【关键词】 沙参麦冬汤 抗氧化 SOD MDA
被动吸烟又称环境烟草烟（ETS），是当今社会倍受重视的危害人体健康、污染公共卫生的主要问题之一。呼吸道是其侵袭人体的首要部位，有毒物质短时间内就能造成上呼吸道的损伤，烟雾刺激可使肺功能和结构遭到破坏，造成多种呼吸系统疾病，减弱机体抗氧化能力。沙参麦冬汤出自清代温病学家吴鞠通的《温病条辨》，是润养肺胃，清热生津之常用方剂，临床常用于多种呼吸道疾病的治疗。本实验拟通过建立二手烟小鼠模型，初步探讨沙参麦冬汤加味对被动吸烟小鼠抗氧化能力的影响。
1 材料与实施方法
1.1 实验动物与分组
四周龄昆明小鼠，雄性64只，体重 20±3g购于山东鲁抗动物药业有限公司，生产许可证号：scxk（鲁）2013-0001。小鼠随机分为4组，即空白对照组、模型组、预防干预高剂量组、预防干预低剂量组，每组16只。
1.2 药品试剂
①沙参麥冬汤加味
组成及剂量：北沙参20g、麦冬20g、花粉15g、玉竹15g、扁豆20g、桑叶10g、炙甘草6g、黄芪20g均为道地药材，采用免煎颗粒，购于山东中医药大学中鲁医院。
②烟草：哈德门，山东中烟工业公司出品生产，焦油量12mg。生产批号：1H4B180
③SOD活性测定试剂盒，生产批号：2014229；MDA含量测定试剂盒，生产批号：2014229，均购于南京建成生物工程研究所。
1.3 造模方法
参照文献[1、2]，自制熏烟装置，实验第一天起予模型组、预高组、预低组实验小鼠被动吸烟45min，分三次各15min进行，一次3支，实验过程中每隔五分钟打开通风孔通气10s。
1.4 给药周期及剂量：
造模当日开始给药，预高组使用1.5g/ml浓度的药液，
以0.28ml/10g体重灌胃；预低组使用浓度为1g/ml的药液，以0.21ml/10g体重灌胃；空白组和模型组以0.21ml/10g体重用生理盐水灌胃，各组操作均连续进行20天。
1.5 指标及观测方法：
①每天观察小鼠一般情况，五天测量一次小鼠体重。
②实验结束摘取小鼠肺脏由山东省中医院病理科制作常规HE染色病理切片。
③严格依照试剂盒说明书所示测小鼠肺组织匀浆SOD活性、MDA的含量。
1.6 统计学处理方法：
采用SPSS 19.0统计软件进行单因素方差分析和LSD多重比较，实验数据用平均数±标准差表示（x±SD）。
2 结果
2.1 病理学观察
空白组小鼠肺组织结构完整，气道壁、上皮细胞完整，细胞排列整齐；模型组小鼠肺间隔结缔组织增厚，大多数肺泡隔弹性纤维破坏，形成大空泡，伴有明显的炎性细胞侵润，各类气管均受损，出现管壁不全、平滑肌断裂、上皮细胞排列稀松、脱落现象；预高组小鼠部分肺泡融合形成空泡，细支气管上皮细胞缺损，程度较轻，可见少量炎性细胞存在；预低组肺组织较预高组完整，肺泡空洞较小，细支气管上皮细胞排列较为完整。
2.2 组间SOD活性及MDA含量的比较（n=16）
3 讨论与结论
烟草等混合烟雾的吸入通过使肺脏组织自由基代谢紊乱，发生较强的脂质过氧化反应，从而明显损害肺脏组织的抗氧化系统[3]，对正常小鼠SOD活性、MDA含量的影响是显著的（P<0.01），因而进行抗氧化治疗减轻被动吸烟对肺部的损伤十分重要的。现代研究也表明，沙参麦冬汤对羟基自由基或超氧自由基具有抑制和清除作用[4、5、6]，过氧化物终产物丙二醛的生成具有明显抑制作用[7]。SOD是生物体内重要的抗氧化酶，能对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害，并及时修复受损细胞，沙参麦冬汤加味能提高被动吸烟小鼠SOD活性（P<0.05），改善被动吸烟小鼠氧化与抗氧化系统失衡的状态。MDA是生物体内自由基作用于脂质发生过氧化反应的氧化终产物，对肺组织中多种生物膜结构有损害作用，并且具有细胞毒性，沙参麦冬汤加味能降低被动吸烟小鼠MDA含量（P<0.05），减弱脂质过氧化。不同组间指标的对比均具有统计学意义，说明沙参麦冬汤加味对被动吸烟小鼠抗氧化能力有一定保护作用。
参考文献
[1]都本业，翁心植.关于被动吸烟危害的实验研究[J].中华结核和呼吸杂志，1991（2）：76-78.
[2]张大鹏，胡隆大，李辟.实验性被动吸烟小鼠的呼吸道病理形态学观察[J]中华结合呼吸杂志，1987，10（4）：224—225.
[3]李静，李彬彬，尹磊，陈会良，刘德义. 沙参麦冬汤对慢支模型大鼠肺脏抗氧化能力及其组织结构的影响[J]. 安徽科技学院学报，2013，27（3）6-10.
[4]李建刚，李庆典.沙参多糖对自由基的清除作用[J].中国酿造，2011（3）：66-68.
[5]刘榴，张白嘉.麦冬及有效部位药理作用研究进展[J].四川中医，2010，28（12）：39-41.
[6]姜玉兰，朴惠善，李镐.桑叶抗氧化活性成分的研究[J].中药材，2008，31（5）：729-731.
[7]谢子任.甘草药理活性的研究[J].中国实用医药，2009，4（7）：232-233.