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【摘 要】 目的:探究沙参麦冬汤加味对被动吸烟小鼠抗氧化能力的影响。方法:将64只大鼠随机平均分为四组,采用自制熏烟装置,依据文献[1、2]建立被动吸烟呼吸系统损伤模型,治疗组在造模同时给药,造模完成后观察其肺组织病理学变化,测定肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)的含量。结果:沙参麦冬汤加味可明显改善小鼠肺组织病理学病变,提高小鼠肺组织中SOD活性,降低MDA的含量。结论:沙参麦冬汤加味对小鼠抗氧化能力具有一定的保护作用。
【关键词】 沙参麦冬汤 抗氧化 SOD MDA
被动吸烟又称环境烟草烟(ETS),是当今社会倍受重视的危害人体健康、污染公共卫生的主要问题之一。呼吸道是其侵袭人体的首要部位,有毒物质短时间内就能造成上呼吸道的损伤,烟雾刺激可使肺功能和结构遭到破坏,造成多种呼吸系统疾病,减弱机体抗氧化能力。沙参麦冬汤出自清代温病学家吴鞠通的《温病条辨》,是润养肺胃,清热生津之常用方剂,临床常用于多种呼吸道疾病的治疗。本实验拟通过建立二手烟小鼠模型,初步探讨沙参麦冬汤加味对被动吸烟小鼠抗氧化能力的影响。
1 材料与实施方法
1.1 实验动物与分组
四周龄昆明小鼠,雄性64只,体重 20±3g购于山东鲁抗动物药业有限公司,生产许可证号:scxk(鲁)2013-0001。小鼠随机分为4组,即空白对照组、模型组、预防干预高剂量组、预防干预低剂量组,每组16只。
1.2 药品试剂
①沙参麥冬汤加味
组成及剂量:北沙参20g、麦冬20g、花粉15g、玉竹15g、扁豆20g、桑叶10g、炙甘草6g、黄芪20g均为道地药材,采用免煎颗粒,购于山东中医药大学中鲁医院。
②烟草:哈德门,山东中烟工业公司出品生产,焦油量12mg。生产批号:1H4B180
③SOD活性测定试剂盒,生产批号:2014229;MDA含量测定试剂盒,生产批号:2014229,均购于南京建成生物工程研究所。
1.3 造模方法
参照文献[1、2],自制熏烟装置,实验第一天起予模型组、预高组、预低组实验小鼠被动吸烟45min,分三次各15min进行,一次3支,实验过程中每隔五分钟打开通风孔通气10s。
1.4 给药周期及剂量:
造模当日开始给药,预高组使用1.5g/ml浓度的药液,
以0.28ml/10g体重灌胃;预低组使用浓度为1g/ml的药液,以0.21ml/10g体重灌胃;空白组和模型组以0.21ml/10g体重用生理盐水灌胃,各组操作均连续进行20天。
1.5 指标及观测方法:
①每天观察小鼠一般情况,五天测量一次小鼠体重。
②实验结束摘取小鼠肺脏由山东省中医院病理科制作常规HE染色病理切片。
③严格依照试剂盒说明书所示测小鼠肺组织匀浆SOD活性、MDA的含量。
1.6 统计学处理方法:
采用SPSS 19.0统计软件进行单因素方差分析和LSD多重比较,实验数据用平均数±标准差表示(x±SD)。
2 结果
2.1 病理学观察
空白组小鼠肺组织结构完整,气道壁、上皮细胞完整,细胞排列整齐;模型组小鼠肺间隔结缔组织增厚,大多数肺泡隔弹性纤维破坏,形成大空泡,伴有明显的炎性细胞侵润,各类气管均受损,出现管壁不全、平滑肌断裂、上皮细胞排列稀松、脱落现象;预高组小鼠部分肺泡融合形成空泡,细支气管上皮细胞缺损,程度较轻,可见少量炎性细胞存在;预低组肺组织较预高组完整,肺泡空洞较小,细支气管上皮细胞排列较为完整。
2.2 组间SOD活性及MDA含量的比较(n=16)
3 讨论与结论
烟草等混合烟雾的吸入通过使肺脏组织自由基代谢紊乱,发生较强的脂质过氧化反应,从而明显损害肺脏组织的抗氧化系统[3],对正常小鼠SOD活性、MDA含量的影响是显著的(P<0.01),因而进行抗氧化治疗减轻被动吸烟对肺部的损伤十分重要的。现代研究也表明,沙参麦冬汤对羟基自由基或超氧自由基具有抑制和清除作用[4、5、6],过氧化物终产物丙二醛的生成具有明显抑制作用[7]。SOD是生物体内重要的抗氧化酶,能对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害,并及时修复受损细胞,沙参麦冬汤加味能提高被动吸烟小鼠SOD活性(P<0.05),改善被动吸烟小鼠氧化与抗氧化系统失衡的状态。MDA是生物体内自由基作用于脂质发生过氧化反应的氧化终产物,对肺组织中多种生物膜结构有损害作用,并且具有细胞毒性,沙参麦冬汤加味能降低被动吸烟小鼠MDA含量(P<0.05),减弱脂质过氧化。不同组间指标的对比均具有统计学意义,说明沙参麦冬汤加味对被动吸烟小鼠抗氧化能力有一定保护作用。
参考文献
[1]都本业,翁心植.关于被动吸烟危害的实验研究[J].中华结核和呼吸杂志,1991(2):76-78.
[2]张大鹏,胡隆大,李辟.实验性被动吸烟小鼠的呼吸道病理形态学观察[J]中华结合呼吸杂志,1987,10(4):224—225.
[3]李静,李彬彬,尹磊,陈会良,刘德义. 沙参麦冬汤对慢支模型大鼠肺脏抗氧化能力及其组织结构的影响[J]. 安徽科技学院学报,2013,27(3)6-10.
[4]李建刚,李庆典.沙参多糖对自由基的清除作用[J].中国酿造,2011(3):66-68.
[5]刘榴,张白嘉.麦冬及有效部位药理作用研究进展[J].四川中医,2010,28(12):39-41.
[6]姜玉兰,朴惠善,李镐.桑叶抗氧化活性成分的研究[J].中药材,2008,31(5):729-731.
[7]谢子任.甘草药理活性的研究[J].中国实用医药,2009,4(7):232-233.
【关键词】 沙参麦冬汤 抗氧化 SOD MDA
被动吸烟又称环境烟草烟(ETS),是当今社会倍受重视的危害人体健康、污染公共卫生的主要问题之一。呼吸道是其侵袭人体的首要部位,有毒物质短时间内就能造成上呼吸道的损伤,烟雾刺激可使肺功能和结构遭到破坏,造成多种呼吸系统疾病,减弱机体抗氧化能力。沙参麦冬汤出自清代温病学家吴鞠通的《温病条辨》,是润养肺胃,清热生津之常用方剂,临床常用于多种呼吸道疾病的治疗。本实验拟通过建立二手烟小鼠模型,初步探讨沙参麦冬汤加味对被动吸烟小鼠抗氧化能力的影响。
1 材料与实施方法
1.1 实验动物与分组
四周龄昆明小鼠,雄性64只,体重 20±3g购于山东鲁抗动物药业有限公司,生产许可证号:scxk(鲁)2013-0001。小鼠随机分为4组,即空白对照组、模型组、预防干预高剂量组、预防干预低剂量组,每组16只。
1.2 药品试剂
①沙参麥冬汤加味
组成及剂量:北沙参20g、麦冬20g、花粉15g、玉竹15g、扁豆20g、桑叶10g、炙甘草6g、黄芪20g均为道地药材,采用免煎颗粒,购于山东中医药大学中鲁医院。
②烟草:哈德门,山东中烟工业公司出品生产,焦油量12mg。生产批号:1H4B180
③SOD活性测定试剂盒,生产批号:2014229;MDA含量测定试剂盒,生产批号:2014229,均购于南京建成生物工程研究所。
1.3 造模方法
参照文献[1、2],自制熏烟装置,实验第一天起予模型组、预高组、预低组实验小鼠被动吸烟45min,分三次各15min进行,一次3支,实验过程中每隔五分钟打开通风孔通气10s。
1.4 给药周期及剂量:
造模当日开始给药,预高组使用1.5g/ml浓度的药液,
以0.28ml/10g体重灌胃;预低组使用浓度为1g/ml的药液,以0.21ml/10g体重灌胃;空白组和模型组以0.21ml/10g体重用生理盐水灌胃,各组操作均连续进行20天。
1.5 指标及观测方法:
①每天观察小鼠一般情况,五天测量一次小鼠体重。
②实验结束摘取小鼠肺脏由山东省中医院病理科制作常规HE染色病理切片。
③严格依照试剂盒说明书所示测小鼠肺组织匀浆SOD活性、MDA的含量。
1.6 统计学处理方法:
采用SPSS 19.0统计软件进行单因素方差分析和LSD多重比较,实验数据用平均数±标准差表示(x±SD)。
2 结果
2.1 病理学观察
空白组小鼠肺组织结构完整,气道壁、上皮细胞完整,细胞排列整齐;模型组小鼠肺间隔结缔组织增厚,大多数肺泡隔弹性纤维破坏,形成大空泡,伴有明显的炎性细胞侵润,各类气管均受损,出现管壁不全、平滑肌断裂、上皮细胞排列稀松、脱落现象;预高组小鼠部分肺泡融合形成空泡,细支气管上皮细胞缺损,程度较轻,可见少量炎性细胞存在;预低组肺组织较预高组完整,肺泡空洞较小,细支气管上皮细胞排列较为完整。
2.2 组间SOD活性及MDA含量的比较(n=16)
3 讨论与结论
烟草等混合烟雾的吸入通过使肺脏组织自由基代谢紊乱,发生较强的脂质过氧化反应,从而明显损害肺脏组织的抗氧化系统[3],对正常小鼠SOD活性、MDA含量的影响是显著的(P<0.01),因而进行抗氧化治疗减轻被动吸烟对肺部的损伤十分重要的。现代研究也表明,沙参麦冬汤对羟基自由基或超氧自由基具有抑制和清除作用[4、5、6],过氧化物终产物丙二醛的生成具有明显抑制作用[7]。SOD是生物体内重要的抗氧化酶,能对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害,并及时修复受损细胞,沙参麦冬汤加味能提高被动吸烟小鼠SOD活性(P<0.05),改善被动吸烟小鼠氧化与抗氧化系统失衡的状态。MDA是生物体内自由基作用于脂质发生过氧化反应的氧化终产物,对肺组织中多种生物膜结构有损害作用,并且具有细胞毒性,沙参麦冬汤加味能降低被动吸烟小鼠MDA含量(P<0.05),减弱脂质过氧化。不同组间指标的对比均具有统计学意义,说明沙参麦冬汤加味对被动吸烟小鼠抗氧化能力有一定保护作用。
参考文献
[1]都本业,翁心植.关于被动吸烟危害的实验研究[J].中华结核和呼吸杂志,1991(2):76-78.
[2]张大鹏,胡隆大,李辟.实验性被动吸烟小鼠的呼吸道病理形态学观察[J]中华结合呼吸杂志,1987,10(4):224—225.
[3]李静,李彬彬,尹磊,陈会良,刘德义. 沙参麦冬汤对慢支模型大鼠肺脏抗氧化能力及其组织结构的影响[J]. 安徽科技学院学报,2013,27(3)6-10.
[4]李建刚,李庆典.沙参多糖对自由基的清除作用[J].中国酿造,2011(3):66-68.
[5]刘榴,张白嘉.麦冬及有效部位药理作用研究进展[J].四川中医,2010,28(12):39-41.
[6]姜玉兰,朴惠善,李镐.桑叶抗氧化活性成分的研究[J].中药材,2008,31(5):729-731.
[7]谢子任.甘草药理活性的研究[J].中国实用医药,2009,4(7):232-233.