观察miR-451对巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的调控及对结肠癌细胞增殖与迁移的影响。
方法脂质体Lipofectamine™3000将miR-451 mimics和miR-451 NC转入SW480结肠癌细胞中，实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-451表达，噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力，细胞克隆形成实验检测细胞克隆能力，流式细胞术检测细胞周期，Transwell实验检测细胞迁移能力，Real-time PCR法及蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中MIF蛋白及mRNA表达，并进行荧光素酶报告基因分析。
结果miR-451 mimics组(2.46±0.25)中miR-451表达量高于miR-451 NC组(1.00±0.11，t＝52.374，P<0.05)。miR-451 mimics组(0.37±0.03)细胞活力低于miR-451 NC组(0.58±0.06，t＝30.672，P<0.05)。miR-451 mimics组(41.56±4.17)细胞克隆数目少于miR-451 NC组(132.37±11.29，t＝73.927，P<0.05)。miR-451 mimics组G1期长于miR-451 NC组(t＝4.093，P<0.05)，miR-451 mimics组G2期短于miR-451 NC组(t＝6.349，P<0.05)。miR-451 mimics组[(56.59±5.66)个]细胞迁移袭数目少于miR-451 NC组[(184.73±18.47)个，t＝64.992，P<0.05]。miR-451 mimics＋ pGL4 MIF 3’端非编码区(3’UTR)-Wt组的荧光强度低于其它所有转染组(F＝2 875.12，P<0.05)。miR-451 mimics组(0.35±0.03)中MIF mRNA表达量低于与miR-451 NC组(1.00±0.10)(t＝61.001，P<0.05)。Western blot实验结果表明，miR-451 mimics组(0.23±0.02)中MIF蛋白表达量低于miR-451 NC组(0.92±0.10)(t＝66.293，P<0.05)。
结论miR-451表达量上调后能够通过负性调控MIF表达，抑制SW480细胞增殖与迁移。