【摘 要】
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目的克隆和研究支气管哮喘患儿白细胞介素-4(IL-4)近侧启动子区DNA序列的多态性. 方法取40名有明显家族及过敏史的哮喘患儿和10名正常儿童,多聚酶链式反应(PCR)结合单链构象
【机 构】
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深圳市儿童医院儿科研究所分子免疫学实验室,华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科分子生物学实验室
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目的克隆和研究支气管哮喘患儿白细胞介素-4(IL-4)近侧启动子区DNA序列的多态性. 方法取40名有明显家族及过敏史的哮喘患儿和10名正常儿童,多聚酶链式反应(PCR)结合单链构象多态性(SSCP )扩增、筛选IL-4近侧启动子片段,进一步构建正常对照和异常条带PCR产物的重组质粒pIL-4-Jx2,并用双脱氧链终止法对重组质粒进行序列测定. 结果在40名患儿SSCP分析中发现了7组异常条带.DNA测序结果显示有四处变异位点位于已知的调控元件之内或毗邻位点: 一名病人-229位C被A所替代,该变异恰好位于IL-4正性调节元件-Ⅰ(PRE-Ⅰ)元件之内;两名病人负性调节元件-Ⅱ(NRE-Ⅱ)元件毗邻C被T所替代, TATA框前增加一个G;一名病人STAT-6元件附近缺少了ATTTT五碱基核苷酸.结论过敏性哮喘患儿IL-4近侧启动子区DNA序列存在多态性,这可能与IL-4基因异常表达及哮喘的发病有关.
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