【摘 要】
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中性条件下,铽(Ⅲ)与环丙沙星反应极易形成络合物.该络合物与小牛胸腺DNA分子作用后荧光强度显著增强,据此建立了简单、快速、灵敏的DNA测定方法,并优选出反应的最佳条件为:2
【机 构】
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中国药科大学基础部,法国癌症和免疫基因研究所,南京大学生命科学学院药物生物技术国家重点实验室,法国巴黎第五大学药学院
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中性条件下,铽(Ⅲ)与环丙沙星反应极易形成络合物.该络合物与小牛胸腺DNA分子作用后荧光强度显著增强,据此建立了简单、快速、灵敏的DNA测定方法,并优选出反应的最佳条件为:25℃,λex/λem=325/545 nm,Tb3+浓度5.0×10-5mol·L-1,环丙沙星浓度1.0×10-6 mol·L-1,Tris-HCl缓冲溶液,pH 7.0.结果表明,在4.3×10-7～3.0×10-5mol·L-1浓度范围内DNA与其荧光强度呈良好的线性关系,其线性方程为F1-F0=107c+48.00(r=0.998 8,n=8),检出限为2.8×10-9mol·L-1.此法同时用于临床近20例全血DNA提取样本的检测,经t检验,两组在545 nm所得的荧光强度有差异(P＜0.05).
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