【摘 要】
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用7L发酵罐对毕赤酵母（Pichia pastoris）工程菌株NB01进行了重组几丁质酶的诱导表达,通过提高通气量和调整搅拌转速,使溶氧维持在30%以上,NB01可在发酵84h内达到产酶高峰,酶活
【机 构】
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国家农产品保鲜工程技术研究中心天津市农产品采后生理与贮藏保鲜重点实验室,南开大学分子生物学研究所生物活性材料教育部重点实验室
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用7L发酵罐对毕赤酵母（Pichia pastoris）工程菌株NB01进行了重组几丁质酶的诱导表达,通过提高通气量和调整搅拌转速,使溶氧维持在30%以上,NB01可在发酵84h内达到产酶高峰,酶活最高可达48.0795U/mL。利用中空纤维超滤膜对发酵液浓缩、提纯,再经过Sephadex G-100柱层析后得到单一组分的重组几丁质酶,酶纯度提高了7.9961倍。重组几丁质酶在60℃以下具有良好的热稳定性,在pH2￣6范围内有较强的耐受力,在4℃条件下贮藏具有较好的稳定性。
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