【摘 要】
：
目的:采用RNA干扰技术抑制小鼠骨髓树突状细胞(DC)髓样分化因子88(MyD88)的表达, 并检测其对细胞生物学活性的影响, 为DC的临床应用奠定基础.方法:针对MyD88基因, 采用化学合
【机 构】
：
华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科,湖北,武汉,430022
论文部分内容阅读
目的:采用RNA干扰技术抑制小鼠骨髓树突状细胞(DC)髓样分化因子88(MyD88)的表达, 并检测其对细胞生物学活性的影响, 为DC的临床应用奠定基础.方法:针对MyD88基因, 采用化学合成法合成3对MyD88 siRNA(序列1、序列2及序列3), 并转染DC2.4 细胞.采用半定量RT-PCR及Western blot分别从mRNA和蛋白质水平检测DC MyD88的表达情况, 筛选其中一对高效RNA(序列3)转染DC2.4 细胞(RNA干扰组), 以未转染RNA的DC2.4细胞作为对照组, 分别给予1mg/L的脂多糖(LPS)刺激.流式细胞术(FCM)检测DC细胞表面CD80、 CD86及MHC-Ⅱ分子的变化, ELISA法检测DC分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-12(IL-12)的浓度, 免疫细胞化学检测DC核因子-κB(NF-κB)的表达, 混合淋巴细胞培养检测T细胞增殖能力, 观察RNA干扰对LPS促DC成熟的影响.结果:与空白对照组相比, 序列2组及序列3组DC的mRNA和蛋白质表达分别降低90%和85%、 92%和88%, 差异有统计学意义; 脂质体对照组、无义siRNA对照组及序列1组DC的mRNA和蛋白质表达无显著差异.经LPS刺激后, 与对照组相比, RNA干扰组CD80、 CD86及MHC-Ⅱ分子的表达, TNF-α、 IFN-γ及IL-12的浓度及T细胞增殖能力均显著下降, 且未见明显NF-κB核转位.结论:RNA干扰技术能显著下调小鼠DC MyD88的表达, 并显著抑制LPS促DC成熟的效应, 为以DC MyD88为靶向、相关疾病的基因治疗提供了新思路和手段.
其他文献
基于矩阵多元多项式的带余除法,给出了代数情形多项式组特征列的一种新求法,并举例验证了这种方法的有效性.
对本课题组十几年来的(n, x)反应实验研究工作进行了评述. 介绍了屏栅电离室的特点、构造与工作原理. 用屏栅电离室在北京大学4.5 MV静电加速器上测量了1-7 MeV中子6Li(n, t)
莪术醇分子中含有末端双键,将其置于Woodward-Prévost反应条件下,并未获得α-碘代乙酸酯、双乙酸酯、羟基乙酸酯等衍生物,而得到几个不同产物A～C.产物A～C通过质谱、核磁共振和
城建档案建设存在的主要问题rn城建档案管理机构不健全,档案人员严重不足,接收与收集工作不力.缺乏行之有效的管理法规和具体办法.国家建设部、档案局虽下发了相关法规,一定
采用线性化量子流体动力学（Quantum Hydrodynamics Q HD ）模型和 Poisson方程相结合，研究了离子束与存在基底的双层二维电子气平面相互作用时的静电激发现象。选择恰当边界条件，
26Al 是核天体物理非常重要的一个核素, 14N(16O, α) 26Al的反应截面可能是天体26Al的一个来源. 介绍了利用AMS方法测量14N(16O, α) 26Al 反应截面的过程, 包括靶的照射、
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
请下载后查看，本文暂不支持在线获取查看简介。
Please download to view, this article does not support online access to view profile.
众所周知,当一个数列用两个函数式表示,即an={f(n),n=2k-1g(n),n=2k (k∈N)时,可合并写成an=1+(-1)n+1/2f(n)+1+(-1)n/2g(n)(n∈N) ①,那么当一个数列用三个函数式表示,即an=
最近,Q准则被用来研究设计在模型未知前提下的投影效率,并用它作为因子筛选准则来筛选最优的设计.本文里,我们将讨论double设计D(d)与其初始设计d的Q准则之间的联系.