出血热恢复期患者全套噬菌体抗体库的构建

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rockyliangchao
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以3种方法从出血热恢复期患者外周血淋巴细胞(PBL)成功地扩增出人抗体V区3种基因片段(VH,Vκ,Vλ),通过搭桥拼接延伸反应(SOE),以(Gly4Ser)3为连接子,将重、轻链V区基因连接成为VH-Linker-Vκ和VH-Linker-Vλ两种单链抗体(ScFv)基因。然后将ScFv基因与载体pHEN1重组,转染感受态大肠杆菌TG1,通过辅助噬菌体M13KO7的超感染,制备成两种“噬菌体展示人源性全套ScFv抗体文库”,为下一步从噬菌体抗体库中筛选所需抗体基因进行测序和表达提供了基础。
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