【摘 要】
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本研究利用PCR扩增PCV2ORF2基因，构建重组原核表达载体pET30a-ORF2，并通过酶切和测序鉴定，将测序正确的阳性重组菌接种至含卡那霉素的LB培养基中，经IPTG诱导表达，分别对表达产物进行SDS-PAGE分析及Western-Blot鉴定，并进行动物免疫以及攻毒试验评价其免疫原性及应用性。结果显示，蛋白分子质量大小为37kDa的PCV2Cap基因在大肠杆菌中获得表达；免疫猪PCV2Ca
【机 构】
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甘肃农业大学动物医学院,山东华宏生物工程有限公司
【基金项目】
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山东省重大科技创新工程（2019JZZY010720）
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本研究利用PCR扩增PCV2ORF2基因，构建重组原核表达载体pET30a-ORF2，并通过酶切和测序鉴定，将测序正确的阳性重组菌接种至含卡那霉素的LB培养基中，经IPTG诱导表达，分别对表达产物进行SDS-PAGE分析及Western-Blot鉴定，并进行动物免疫以及攻毒试验评价其免疫原性及应用性。结果显示，蛋白分子质量大小为37kDa的PCV2Cap基因在大肠杆菌中获得表达；免疫猪PCV2Cap血清抗体ELISA滴度不低于1:1600，免疫攻毒评价保护率为100%。猪圆环病毒2型Cap蛋白的成功表达，并具有良好的免疫原性，为研发更稳定、安全、高效的亚单位疫苗奠定了基础。
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