观察长链非编码RNA SPRY4-IT1在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达及其调控细胞增殖的分子生物学功能。
方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测32例NSCLC患者癌组织和远癌正常肺组织中SPRY4-IT1的相对表达量;肺癌A549细胞株内转染针对SPRY4-IT1序列的小干扰RNA(si-SPRY4-IT1)和无关序列(si-nc),采用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验计数两组细胞增殖情况并绘制生长曲线;采用结晶紫染色实验观察细胞克隆形成情况。采用Western blot检测转染si-SPRY4-IT1后A549细胞中锌指蛋白703(ZNF703)蛋白表达。
结果SPRY4-IT1在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的相对表达量分别为3.24±2.01和1.12±0.78,癌组织中的相对表达量显著高于癌旁组织(t=5.560,P=0.001);非小细胞肺癌细胞株A549转染si-SPRY4-IT1后,细胞中SPRY4-IT1表达水平显著降低(P=0.001);CCK-8实验显示,转染si-SPRY4-IT1的A549细胞增殖能力显著降低(P=0.001);结晶紫染色显示,转染si-SPRY4-IT1的A549细胞克隆形成能力显著降低(P=0.001);转染si-SPRY4-IT1和si-nc的A549肺癌细胞中ZNF703 mRNA相对表达量分别为0.61±0.07和0.96±0.08,si-SPRY4-IT1细胞显著低于si-nc细胞(P=0.001);ZNF703蛋白相对表达量分别为0.08±0.02和0.12±0.03,si-SPRY4-IT1细胞显著低于si-nc细胞(P=0.001)。
结论长链非编码RNA SPRY4-IT1在NSCLC中高表达,并可通过增强ZNF703表达促进肺癌细胞的增殖。