高效表达乙型肝炎病毒表面抗原的CHO细胞株的建立

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tx9yhbkyyp
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 探索乙型肝炎病毒表面抗原(S)基因在CHO无血清细胞培养系统中的高效表达.方法 构建包含乙肝病毒S基因的质粒,转染CHO细胞,经MTX筛选后对培养液上清中的表达产物进行血清学检测以及形态学的观察.结果 获得了能高效稳定表达HBsAg的CHO细胞株,电镜下可观测到小球型和管型颗粒,ELISA检测表达产物滴度达到1:5000.结论 成功构建高效表达乙型肝炎病毒S蛋白的CHO无血清培养细胞株,表达的HBsAg具有良好的抗原活性。

其他文献
目的 回顾性研究73例重型肝炎临床特点及预后影响因素.方法 总结73例重型肝炎患者临床特点,按病因、发病性质分组,回顾性分析肝功、肾功、电解质、PTA等生化指标,肝性脑病、上消化道出血、肝肾综合征、腹水、腹腔感染等合并症情况,进行统计学处理,研究上述因素与预后关系.结果 (1)73例重型肝炎中单独HBV感染占65.75%,酒精性肝病5例(6.85%),药物性肝损伤6例(8.22%),戊型肝炎2例(
目的 检测慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者外周血中Th17细胞表面趋化因子受体CCR4、CCR6、CXCR3的表达,分析CCR4、CCR6、CXCR3与丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)及HBV DNA载量的相关性.方法 流式细胞仪检测30例CHB患者(CHB组)及15名健康人(对照组)外周血中Th17细胞CCR4、CCR6、CXCR3的表达,与A
随着近年来分子生物学技术的高速发展,以核酸杂交、核酸扩增和核酸序列分析为代表的分子诊断和检测技术在诸多领域中日益凸显出至关重要的作用.新型的分子生物学检测技术包括聚合酶链反应(PCR)、微芯片、高通量测序等,然而,所有现代分子生物学检测技术首先面临的问题就是如何从复杂多样的生物样本中迅速有效地分离和提取所需要的基因组核酸,而且抽提后的核酸质量及其完整性都会直接影响到随后的实验结果.目前,全世界的研
期刊
目的 通过对慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV聚合酶逆转录(RT)区基因序列分析,探讨阿德福韦酯(ADV)单药抗病毒治疗失败,聚合酶RT区变异位点特点及临床意义.方法 采用回顾性分析方法,对接受阿德福韦单药抗病毒治疗出现病毒学突破,经聚合酶RT基因测序,证实存在基因突变的44例患者的聚合酶RT区变异位点、临床特点及随访资料进行分析.结果 44例阿德福韦酯单药治疗患者,至出现RT区变异最短治疗时间
目的 建立一种基于RT-PCR法的简易的HIV-1感染者或艾滋病患者血浆病毒载量筛查方法.方法 在广西南宁市采集18例HIV-1感染者和18例阴性对照者血液标本,提取RNA,以引物LTR-1/LTR-2对待测样本进行PCR扩增,获得Ct值.同时,应用Nuclisens EasyQ HIV-1 v1.2法作为对照对这些样本进行病毒载量检测.对Ct值与病毒载量之间进行相关性分析,获得相应的回归方程.结
目的 分析2010年引起海南省手足口病流行柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)的分子流行病学特征.方法 从海南省2010年手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)标本中分离到56株CA16毒株,用RT-PCR的方法对VP1编码区扩增及核苷酸序列的测定和整理分析,并与CA16各基因型和基因亚型的代表株序列构建亲缘关系进化树.结果
目的 表达和纯化四种单链DNA结合(SSB)蛋白,并探讨其对HCV RNA的绑定.方法 构建四种SSB蛋白的表达质粒,各简写为TTH,SSOB,KOD和BL21.TTH转化BL21 (DE3)感受态细胞,SSOB,KOD和BL21分别转化Transetta(DE3),IPTG诱导表达.镍柱亲和层析纯化,经SDS-PAGE检测表达纯化后的SSB蛋白.并通过TAE电泳检测其对HCV RNA的绑定情况.
目的 探讨人类乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)基因分型检测在宫颈病变诊断中的临床应用价值.方法 选取2010年1月至2012年12月在北京大学第一医院妇产科就诊的1715例患者作为研究对象,所有患者均行宫颈脱落细胞学检查、HPV分型检测及阴道镜检查下行多点活检,并最终经组织病理学检查诊断为宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neopla
目的 建立扎伊尔型埃博拉病毒的核酸检测方法,以期用于埃博拉出血热临床标本的检测.方法 针对扎伊尔型埃博拉病毒核蛋白和糖蛋白基因设计引物和探针,建立单重和双重实时荧光RT-PCR检测方法,利用体外转录病毒RNA和埃博拉病毒系列参考品RNA评价其敏感性,利用马尔堡病毒、健康人、登革热患者和发热伴血小板减少综合征患者血清评价其特异性.结果 所建立的实时荧光RT-PCR检测方法扩增效率在95%~105%,
目的 探讨乙酰半胱氨酸纳米活性碳缓释微囊(ACNAC)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝脏抗氧化能力的影响.方法 通过高脂饮食12周诱导建立NASH大鼠动物模型,分别给予ACNAC高、中、低每日不同剂量(800 mg/kg、400 mg/kg和200 mg/kg)与易善复(0.692 mg/kg)、乙酰半胱氨酸(400 mg/kg)连续灌胃8周后,检测血清生化指标、肝匀浆丙二醛(MDA)含量、