HGV NS5A区部分基因的克隆及表达

来源 :热带医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：luyufan221

【摘要】

：

目的构建含HGV NS5A区基因的原核表达载体.方法采用PCR方法从重组了HGV 6672-7292区段基因的pUC19中扩增出HGV 6864-7277nt片段,定向克隆入pGEMEX1质粒,再经SacⅠ、HindⅢ酶

【作者】

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马会慧李刚廖家杰梁英杰杨绍基 Berwyn Clar

【机构】

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中山大学附属三院传染科,香港玛丽医院胃肠肝病科（香港）,粤港肝炎研究中心（香港）,VirologyUnit.GlaxowellcomeMedicinesCentreEngland

【出处】

：

热带医学杂志

【发表日期】

：

2001年2期

【关键词】

：

庚型肝炎病毒分子克隆基因表达 Hepatitis G virus Molecular cloning Gene expression

【基金项目】

：

国家自然科学基金，广东省医药卫生科研项目

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目的构建含HGV NS5A区基因的原核表达载体.方法采用PCR方法从重组了HGV 6672-7292区段基因的pUC19中扩增出HGV 6864-7277nt片段,定向克隆入pGEMEX1质粒,再经SacⅠ、HindⅢ酶切亚克隆入高效表达载体pRSETA.结果重组pRSET4经序列测定证实插入基因为目的基因,符合表达框架,经IPTG诱导,在BL21(DE3)菌株中表达连接6个组氨酸的HGV NS5A融合蛋白.Western blotting显示在Marker约25kDa处可见明显的蛋白带,与预期结果一致.

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