pET21b-HPV16E4重组质粒的构建及鉴定

来源 :哈尔滨医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kuaiyu001
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目的 构建HPV16E4重组表达质粒,以获得HPV16E4活性蛋白,为进一步研究打基础。方法 从宫颈癌组织中提取DNA,用PCR方法扩增HPV16E4 DNA片段,定向克隆到原核表达载体pET21b质粒中,利用菌液PCR方法筛选重组阳性菌株。提取重组质粒,利用酶切图谱分析方法和核酸序列测定验证重组质粒pET21b-HPV16E4构建的正确性。结果 用PCR方法从宫颈癌组织中扩增出HPV16E4片段,大小为0.3kb。从PCR筛选的重组菌株中提取重组质粒pET21b-HPV16E4,经单酶切得到5.7kb的
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