建立一种人外周血γδΤ细胞细胞内白细胞介素-2(IL-2)的检测方法。

分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC)，用结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)刺激PBMC，获取较高比例的γδΤ细胞。用佛波醇酯＋离子霉素(PMA＋IM)刺激PBMC和γδΤ细胞，用蛋白转运抑制剂(Brefeldin A，BFA)阻断细胞内因子的分泌，用皂角素破膜，流式细胞术检测CD^3＋T细胞内CD69阳性率，以确定最佳的破膜时间，用流式细胞术检测γδΤ细胞内的IL-2的表达。不同组间CD^3＋T细胞内CD69阳性率及细胞内IL-2的阳性率比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用最小显著性(LSD)法检验．。

刺激时间不同，CD^3＋T细胞胞内CD69的阳性率表达不同，皂角素破膜时间为15 min时，CD^3＋T细胞胞内CD69的阳性率最高，达(87.82±2.28)%，与处理5 min[CD69的阳性率(66.86±1.99)%]和25 min[CD69的阳性率(81.73±2.51)%]比较，差异有统计学意义 (F＝112.81，P<0.05)；不同处理组γδΤ细胞内IL-2表达不同，γδΤ细胞受PMA和IM刺激并有BFA存在时表达最高，达(50.65±6.25)%，与γδΤ细胞组(0.55±0.07)%、γδΤ细胞＋PMA＋IM组(0.91±0.12)%和PBMC＋PMA＋IM＋BFA组(0.21±0.03)%比较，差异有统计学意义(F＝321.07，P<0.05)。

流式细胞术是一种检测γδΤ细胞内IL-2的较好方法，为γδΤ细胞内其他分子的检测分析奠定了方法学基础。