【摘 要】
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本文报告一种新的将外源基因导入带壁植物细胞的方法——超声波直接导入外源基因法。将烟草叶片小块置于含pBI121.1质粒的缓冲液中,用声强为0.5w/cm~2的脉冲超声波处理30分钟
【机 构】
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中国农业科学院生物技术研究中心,清华大学生物科学与技术系
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本文报告一种新的将外源基因导入带壁植物细胞的方法——超声波直接导入外源基因法。将烟草叶片小块置于含pBI121.1质粒的缓冲液中,用声强为0.5w/cm~2的脉冲超声波处理30分钟,培养一天后86%的叶块中检测到有GUS基因的短暂表达,叶片组织的平均转化面积高达60%-70%。处理叶块中的60%在含Kan 100mg/1的分化培养基上再生出Kan抗性芽,对照叶块则在此培养基上全部死亡。经检测Kan抗性小植株叶片中的GUS活性,按外植体总数计算,稳定转化率达22.3%,抽样检测NPTⅡ活性和DNA斑点杂交均
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