【摘 要】
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为了研究貂源绿脓杆菌流行株toxA基因的遗传变异情况,并将toxA基因进行原核表达,本试验以貂源绿脓杆菌DNA为模板,经PCR扩增表达外毒素A蛋白的toxA基因,约1 917 bp的片段,将产
【机 构】
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青岛农业大学动物科技学院,烟台市动物卫生监督所
【基金项目】
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青岛市科技计划基础研究项目[11-2-4-5-(3)-jch];科技基础性工作专项(SQ2012FY3260033);山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目(BS2011SW010)
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为了研究貂源绿脓杆菌流行株toxA基因的遗传变异情况,并将toxA基因进行原核表达,本试验以貂源绿脓杆菌DNA为模板,经PCR扩增表达外毒素A蛋白的toxA基因,约1 917 bp的片段,将产物克隆与pMD-18T载体并测序。结果表明,12株流行株的序列与GenBank中的标准产毒株PA103株和PA01株的遗传关系较近,显示外毒素A毒性的氨基酸均未发生突变,流行株变异不大。将该基因亚克隆到原核表达载体pET32a,转化BL21（DE3）感受态细胞,经不同浓度的IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAG
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