结肠癌细胞中组织因子/活性凝血因子Ⅶ-表皮生长因子受体通路间交互作用的初步验证

来源 :北京大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:shirley09liu
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目的:验证结肠癌细胞中组织因子/活性凝血因子Ⅶ(tissue factor/active coagulation factor Ⅶ,TF/FⅦa)通路与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)通路之间是否存在交互作用。方法:在KRAS野生型的HT-29及KRAS突变型的Lo Vo结肠癌细胞中,以FⅦa活化TF/FⅦa通路,采用q RT-PCR、Western blot检测EGFR配体双调蛋白(amphiregulin,AREG)及表皮调节素(epiregulin,EREG)基因、蛋白表达改变;利用RNA干扰技术敲低TF表达后活化TF/FⅦa通路,检测其对AREG、EREG基因表达的影响,以证实FⅦa对AREG、EREG表达调节作用依赖TF。以表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)激活两细胞EGFR通路后,检测TF/FⅦa通路关键分子TF、FⅦ基因表达改变。结果:TF/FⅦa通路活化后,HT-29 细胞AREG、EREG基因表达及EREG蛋白表达水平均较对照组显著下调(AREG、EREG基因表达量分别为 0.55±0.09 vs.0.99±0.09、0.67±0.10 vs.1.02±0.02,EREG蛋白表达量 0.54±0.09vs.1.04±0.13,P均<0.05);Lo Vo细胞AREG基因表达及AREG、EREG蛋白表达水平较对照组显著上调(AREG基因表达量 1.87±0.39 vs.0.93±0.23,AREG、EREG蛋白表达量3.09±0.73 vs.1.11±0.21、1.53±0.19 vs. 0.97±0.23,P均<0.05);TF敲低后均可部分阻断FⅦa对两细胞AREG、EREG表达调节作用;EGFR通路激活后,HT-29细胞TF基因表达较对照组无显著变化,FⅦ基因表达未检测到,而Lo Vo细胞的FⅦ及TF基因表达较对照组均显著上调,表达量分别为 1.53±0.23 vs.1.00±0.23、53.20±6.08 vs.1.00±0.15(P均<0.05)。结论:结肠癌Lo Vo细胞TF/FⅦa通路与EGFR通路的活化可分别上调另一通路的关键分子表达并发生交互作用,KRAS基因突变可能对该交互作用的发生发挥关键作用。
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