【摘 要】
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为揭示2型重组腺相关病毒感染哺乳动物细胞的一些转导特征,构建并制备了一种携带萤火虫荧光素酶基因的重组2型腺相关病毒rAAV2 Luc,研究了该重组病毒体外转导哺乳动物细胞的
【机 构】
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中南大学湘雅医院血液科; 本元正阳基因技术股份有限公司; 中南大学湘雅三医院; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室 长沙410078;
【基金项目】
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八六三"高科技发展计划基因治疗重大关键技术资助项目(863-BH03-05-02)
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为揭示2型重组腺相关病毒感染哺乳动物细胞的一些转导特征,构建并制备了一种携带萤火虫荧光素酶基因的重组2型腺相关病毒rAAV2 Luc,研究了该重组病毒体外转导哺乳动物细胞的量效关系;肝素对转导的拮抗作用;rAAV2的竞争抑制作用;丁酸钠对表达水平的增强作用。结果显示,在一定范围内,随着rAAV2 Luc感染细胞的感染复数(MOI即每个细胞感染的病毒基因组数)值增高,荧光素酶的表达水平也增高;但更高的MOI(>107)反而使荧光素酶的表达水平下降。肝素可特异性阻断rAAV2介导的荧光素酶表达。携带不同基因的2种rAAV2病毒相互具有明显的竞争抑制作用。丁酸钠可显著增强rAAV2介导的荧光素酶表达水平。本研究对rAAV2载体介导的基因转移研究具有一定的指导意义。
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