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【目的】确定拟南芥抗逆转录因子At MYB73的转录活性区域并筛选获得与其互作的蛋白,为进一步阐明At MYB73调控拟南芥抗逆的分子机制奠定基础。【方法】构建转录因子At MYB73的酵母诱饵表达载体p AS1-At MYB73,检测p AS1-At MYB73的自激活性及其对酵母Y190的细胞毒性。克隆At MYB73的N端区域(含有R2R3结构域)和C端区域(不含R2R3结构域),检测At MYB73的N端和C端的转录激活活性,分析At MYB73自激活结构域的位置。利用酵母双杂交技术,以At MYB73为诱饵筛选拟南芥的c DNA文库,将阳性克隆进行鉴定、测序;利用TAIR数据库对筛选获得的At MYB73的候选互作蛋白进行分析。构建At MYB73和F12F1.4的酵母双杂交载体p GBDT7-At MYB73和p GADT7-F12F1.4,通过酵母双杂交技术,对其互作关系进行分析。【结果】含p AS1-MYB73的酵母菌在不同浓度的3-AT的SD/-His/-Trp/、SD/-Ade/-Trp培养基上均能生长,表明At MYB73具有较高的自激活活性。含p AS1-At MYB73的酵母菌在SD/-Trp/Amp液体培养基中培养24 h的OD600值大于0.8,表明诱饵载体对酵母Y190没有细胞毒性。成功构建了p AS1-At MYB73-N和p AS1-At MYB73-C载体,获得了含有p AS1-At MYB73-N和p AS1-At MYB73-C的酵母;含p AS1-At MYB73-N的酵母在含X-a-gal的YPAD培养基上呈现无色,而含p AS1-At MYB73-C的酵母则呈现蓝色,表明At MYB73的C端有明显的自激活性,而N端没有自激活性。以At MYB73为诱饵,筛选拟南芥的c DNA文库,获得了与光合作用、防御反应途径、抗逆等相关的8个蛋白。利用酵母双杂交技术,确定了MYB73与F12F1.4之间存在一定的互作。【结论】拟南芥抗逆转录因子At MYB73具有较高的转录激活活性,其活性区域位于C端;以At MYB73为诱饵,筛选获得了与光合作用、防御反应途径、抗逆等相关的8个At MYB73的候选互作蛋白;利用酵母双杂交技术,确定了At MYB73与F12F1.4之间的互作关系。