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摘 要：本文采用高校液相测定了氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量，固定相为：安捷伦Cl8（4.6mm×250mm，5um），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85）为流动相，检测波长为249nm，流速1.0mL·min-1，柱温：30℃。对乙酰氨基酚在10～60μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。对乙酰氨基酚的平均回收率为99.3%，RSD为0.66%（n=6）；此方法简便、准确、重现性好，可用于氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量测定。
关键词：氨咖黄敏胶囊；对乙酰氨基酚；含量
氨咖黄敏胶囊为常用感冒药。氨咖黄敏胶囊为复方制剂，由对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏、人工牛黄、淀粉、糊精、糖粉组成。氨咖黄敏胶囊用于感冒引起的鼻塞、头痛、咽喉痛、发热等。对乙酰氨基酚是非那西丁在体内的代谢产生，其抑制中枢神经系统前列腺素合成的作用与阿司匹林相似，但抑制外周前列腺素合成作用弱，故解热镇痛作用强，抗风湿作用弱。本文采用高校液相测定了氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量。
1 仪器与试药
HH-601超级恒温水浴（江苏金坛市亿通电子有限公司）；PH-620高精度实验室酸度计（上海禾工科学仪器有限公司）；优普杜伯特UP-DBT-IV实验室洗瓶机（西安优普仪器设备有限公司）；QTSXR10260数控型超声波清洗器（天津市瑞普电子仪器公司）；PTX-FA110万分之一天平（上海鑫仓电子科技有限公司）；屹谱仪器U-1810准双光束紫外可见分光光度计（屹谱仪器制造（上海）有限公司）；Kertone实验室超纯水机（科尔顿（中国）有限公司）；LC3000高效液相色谱仪（山东滕州市滕海分析仪器有限公司）。对乙酰氨基酚对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈（启东市名成化工有限公司）、乙醇（南京维之诚化学试剂有限公司）、磷酸（武汉市伟琪博星生物科技有限公司）、甲醇（武汉市伟琪博星生物科技有限公司）、冰醋酸（济南英出化工科技有限公司）、磷酸二氢钾（启东市名成化工有限公司）、三乙胺（南京维之诚化学试剂有限公司）。
2 含量测定
2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5um）；乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85）为流动相；检测波长为249nm。理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取氨咖黄敏胶囊内容物，精密称取，加流动相超声处理10分钟，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用流动相分次洗涤容器和残渣，洗液滤人同一量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取对乙酰氨基酚对照品约5mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含30μg的溶液，作为对照溶液。
2.4 阴性溶液的制备
依照处方取咖啡因、马来酸氯苯那敏、人工牛黄、淀粉、糊精、糖粉，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在对乙酰氨基酚出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 准曲线的制备
制备浓度为10、15、20、25、30、35、40、45、50、60μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，对乙酰氨基酚对照品在10～60μg·mL-1范围内线性关系良好。
2.6 精密度试验
依照2.3项下制备对照品溶液，精密吸取对乙酰氨基酚对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.89%。结果表明，本实验精密度良好。
2.7 重现性试验
称取同一批的氨咖黄敏胶囊样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.83%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8 稳定性试验
依照2.2项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品对乙酰氨基酚峰面积积分值的RSD为0.85%。结果表明对乙酰氨基酚至少在4小时内稳定。
2.9 回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的对乙酰氨基酚对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.3%，RSD为0.66%。
2.10 样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定氨咖黄敏胶囊三批样品中对乙酰氨基酚的含量，含量为标示量的100.1%、100.3%、99.1%。
3讨论
分别考察乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85），乙腈-0.05mol.L-1磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.0）（30∶70），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（10：10：80），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH4.0）（10：10：80），乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（含三乙胺0.5%，磷酸调pH至3.0）（20：80）不同比例的流动相，结果以乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量测定。氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量应为标示量的95-105%。
参考文献
[1]盖轲，郑阿利.高效液相色谱法同时测定氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量[J].中国药房，2006（06）.
[2]肖海文，曾常青，张志福，许建峰，谭琦珊.氨咖黄敏胶囊质量标准的改进研究[J].广东药学院学报，2014（03）.
[3]刘洪海，刘维彬，李智慧，李海霞，窦靖怡.HPLC波长切换法测定氨咖黄敏胶囊4个成分的含量[J].中国药师，2016（01）.
[4]王慧文，张士洋.氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚含量3种测定方法的比较[J].安徽医药，2005（05）.
[5]仇其原，邓晓文，姚立娟.HPLC-PAD法同时测定精制银翘解毒胶囊中对乙酰氨基酚、绿原酸、连翘苷和牛蒡苷的含量[J].药学与临床研究，2012（05）.
关键词：氨咖黄敏胶囊；对乙酰氨基酚；含量
氨咖黄敏胶囊为常用感冒药。氨咖黄敏胶囊为复方制剂，由对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏、人工牛黄、淀粉、糊精、糖粉组成。氨咖黄敏胶囊用于感冒引起的鼻塞、头痛、咽喉痛、发热等。对乙酰氨基酚是非那西丁在体内的代谢产生，其抑制中枢神经系统前列腺素合成的作用与阿司匹林相似，但抑制外周前列腺素合成作用弱，故解热镇痛作用强，抗风湿作用弱。本文采用高校液相测定了氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量。
1 仪器与试药
HH-601超级恒温水浴（江苏金坛市亿通电子有限公司）；PH-620高精度实验室酸度计（上海禾工科学仪器有限公司）；优普杜伯特UP-DBT-IV实验室洗瓶机（西安优普仪器设备有限公司）；QTSXR10260数控型超声波清洗器（天津市瑞普电子仪器公司）；PTX-FA110万分之一天平（上海鑫仓电子科技有限公司）；屹谱仪器U-1810准双光束紫外可见分光光度计（屹谱仪器制造（上海）有限公司）；Kertone实验室超纯水机（科尔顿（中国）有限公司）；LC3000高效液相色谱仪（山东滕州市滕海分析仪器有限公司）。对乙酰氨基酚对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈（启东市名成化工有限公司）、乙醇（南京维之诚化学试剂有限公司）、磷酸（武汉市伟琪博星生物科技有限公司）、甲醇（武汉市伟琪博星生物科技有限公司）、冰醋酸（济南英出化工科技有限公司）、磷酸二氢钾（启东市名成化工有限公司）、三乙胺（南京维之诚化学试剂有限公司）。
2 含量测定
2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5um）；乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85）为流动相；检测波长为249nm。理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取氨咖黄敏胶囊内容物，精密称取，加流动相超声处理10分钟，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用流动相分次洗涤容器和残渣，洗液滤人同一量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取对乙酰氨基酚对照品约5mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含30μg的溶液，作为对照溶液。
2.4 阴性溶液的制备
依照处方取咖啡因、马来酸氯苯那敏、人工牛黄、淀粉、糊精、糖粉，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在对乙酰氨基酚出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 准曲线的制备
制备浓度为10、15、20、25、30、35、40、45、50、60μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，对乙酰氨基酚对照品在10～60μg·mL-1范围内线性关系良好。
2.6 精密度试验
依照2.3项下制备对照品溶液，精密吸取对乙酰氨基酚对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.89%。结果表明，本实验精密度良好。
2.7 重现性试验
称取同一批的氨咖黄敏胶囊样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.83%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8 稳定性试验
依照2.2项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品对乙酰氨基酚峰面积积分值的RSD为0.85%。结果表明对乙酰氨基酚至少在4小时内稳定。
2.9 回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的对乙酰氨基酚对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.3%，RSD为0.66%。
2.10 样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定氨咖黄敏胶囊三批样品中对乙酰氨基酚的含量，含量为标示量的100.1%、100.3%、99.1%。
3讨论
分别考察乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85），乙腈-0.05mol.L-1磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.0）（30∶70），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（10：10：80），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH4.0）（10：10：80），乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（含三乙胺0.5%，磷酸调pH至3.0）（20：80）不同比例的流动相，结果以乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量测定。氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量应为标示量的95-105%。
参考文献
[1]盖轲，郑阿利.高效液相色谱法同时测定氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量[J].中国药房，2006（06）.
[2]肖海文，曾常青，张志福，许建峰，谭琦珊.氨咖黄敏胶囊质量标准的改进研究[J].广东药学院学报，2014（03）.
[3]刘洪海，刘维彬，李智慧，李海霞，窦靖怡.HPLC波长切换法测定氨咖黄敏胶囊4个成分的含量[J].中国药师，2016（01）.
[4]王慧文，张士洋.氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚含量3种测定方法的比较[J].安徽医药，2005（05）.
[5]仇其原，邓晓文，姚立娟.HPLC-PAD法同时测定精制银翘解毒胶囊中对乙酰氨基酚、绿原酸、连翘苷和牛蒡苷的含量[J].药学与临床研究，2012（05）.