糖原合酶激酶-3β在肝癌细胞迁移过程中的作用

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gsqj123465
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目的通过调节糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)来观察其对肝癌细胞迁移能力的影响,研究GSK-3β在肝癌细胞迁移过程中发挥的作用。方法分别应用GSK-3特异性抑制剂LiCl和SB216763抑制GSK-3β的活性,或转染GSK-3βWT、GSK-3βS9A、GID5-6质粒影响GSK-3β的活性,通过划痕实验、小室迁移实验、微管组织中心体(MTOC)实验等观察处理前后肝癌细胞系SMMC-7721和Hep3B迁移能力的改变,并用免疫细胞化学法观察肝癌细胞迁移后磷酸化GSK-3β(pGSK-3β)的分布。结果划痕实验发现,用LiCl和SB216763处理后,SMMC-7721细胞的相对迁移率分别下降36.44%和41.78%,Hep3B细胞的相对迁移率都下降26.66%。转染GSK-3βWT后,GSK-3β和pGSK-3β表达上调,SMMC-7721细胞相对迁移率降为61.27%;转染GSK-3βS9A后,GSK-3β表达上调,pGSK-3β变化不明显,SMMC-7721细胞相对迁移率降为38.61%;转染GID5-6后,GSK-3β变化不明显,pGSK-3β表达增多,SMMC-7721细胞相对迁移率降为36.49%。免疫细胞化学可见,在正常培养的条件下肝癌细胞发生迁移3h后,细胞内pGSK-3β呈现出在细胞前沿边缘附集的现象;而加入LiCl后,pGSK-3β的分布则未呈现这种边缘附集的现象。MTOC实验发现,未加入抑制剂时Hep3B细胞MTOC阳性率在60%以上,而应用GSK-3β抑制剂后MTOC阳性率明显下降。结论GSK-3β在肝癌细胞的迁移过程中起到重要作用,应用针对GSK-3β的特异性抑制药物能够影响肝癌细胞的极性化,降低肝癌细胞的迁移能力。
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