检测长链非编码RNA(lncRNA)TCONS_00023297在骨肉瘤细胞中的表达以及对骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响。
方法利用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测lncRNA TCONS_00023297在骨肉瘤细胞株中的表达;构建lncRNA TCONS_00023297高表达和低表达细胞株;通过细胞划痕和Transwell实验检测lncRNA TCONS_00023297高表达和低表达对骨肉瘤细胞株U2OS迁移和侵袭的影响;利用细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验检测TCONS_00023297高表达和低表达对骨肉瘤细胞株U2OS增殖的影响;利用蛋白质印迹法(Western blot)和FQ-PCR检测lncRNA TCONS_00023297高表达和低表达对骨肉瘤细胞株U2OS中增殖相关基因CDK4和p21表达的影响。
结果与人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)中lncRNA TCONS_00023297的表达量(1.00±0.11)比较,U2OS中的lncRNA TCONS_00023297的表达量(11.02±0.35)显著升高,差异有统计学意义(t=61.070,P<0.01);与对照组[(65.47±5.69)%]比较,lncRNA TCONS_00023297过表达组[(87.12±3.98)%]迁移率显著升高,差异有统计学意义(t=6.971,P<0.05);与过表达对照组(128.50±16.25)比较,lncRNA TCONS_00023297过表达组(198.5±22.36)侵袭细胞数目显著升高,差异有统计学意义(t=5.662,P<0.05);lncRNA TCONS_00023297过表达组与对照组比较U2OS细胞增殖能力增强;lncRNA TCONS_00023297低表达组与对照组比较U2OS细胞增殖能力减弱;lncRNA TCONS_00023297过表达组与对照组比较U2OS细胞中CDK4表达增多而p21表达下降;lncRNA TCONS_00023297低表达组与对照组比较U2OS细胞中CDK4表达降低而p21表达增多。
结论lncRNA TCONS_00023297促进U2OS细胞增殖、迁移和侵袭。