柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定家兔关节微透析液中的精氨酸和瓜氨酸

来源 :中药新药与临床药理 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mikelau1
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目的建立一种稳定的同时测定家兔关节微透析液中精氨酸和瓜氨酸的方法。方法利用微透析技术从抗原诱导性关节炎家兔的关节腔中取样,荧光检测器反相高效液相色谱法检测样品中精氨酸和瓜氨酸浓度。衍生剂为邻苯二甲醛(OPA),色谱柱为Boston Green C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A为甲醇,B为50mmol.L-1乙酸钠(用冰乙酸调pH=4.5),采用二元梯度洗脱,λEx=342 nm,λEm=446 nm,流速1 mL.min-1,柱温25℃。结果两种氨基酸在40 min内得到了很好的分离,精氨酸和瓜氨酸分别在0.054~6.480μg.mL-1(r=0.9993),0.0525~6.3000μg.mL-1(r=0.999)内呈良好的线性关系,检测限分别为12.58 ng.mL-1和9.08 ng.mL-1,精密度RSD分别为0.86%和1.04%。结论该方法简便、灵敏、准确,适用于关节微透析液中精氨酸和瓜氨酸的同时测定。
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