胰腺炎患者中血清淀粉酶的活性测定及临床意义

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  摘要:目的:探讨胰腺炎患者中测定血清淀粉酶的活性及临床意义。方法:对选取临床上胰腺炎患者80例进行血清淀粉酶活性的测定及分析其临床意义的分析。结果:急性胰腺炎患者54例、慢性胰腺炎患者18例、胰腺癌患者8例。结论:胰腺癌早期、急性胰腺炎、慢性胰腺炎急性发作时,血清淀粉酶会明显升高。检测血清淀粉酶的活性是诊断胰腺炎的重要指标。
  关键词:测定血清淀粉酶的活性;磺-淀粉比色法;临床意义【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】1672-8602(2014)02-0192-01
  淀粉酶(AMY或AMS)是能将多种糖化合物,其全称是1,4-α-D-葡聚糖水解酶,一般作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖元等α-1,4-葡聚糖,水解α-1,4-糖苷键的酶,在催化淀粉及糖原水解下,可生成葡萄糖、麦芽糖及含有α1,6-糖苷键支链的糊精。人体内只含有的淀粉酶属α-淀粉酶,又称淀粉内切酶。α-淀粉酶不仅作用于淀粉末端,还可作用于其内部的1,4-糖苷键,对1,4-糖苷键连接的葡聚糖具有特异性。但是不能水解1,6-糖苷键连接的葡聚糖。淀粉酶主要来源于胰腺和唾液腺,分别称为:p-AMY和s-AMY。此外肺、肝、甲状腺、脂肪等组织也含有α-淀粉酶。其测定主要为碘-淀粉比色法。
  1临床资料
  1.1一般资料: 本组收治临床上患有胰腺炎病人80例,其中男性48例,女性32例,年龄24~72岁。
  1.2方法:采用碘-淀粉比色法检测。
  1.2.1检验原理: 血清中α-淀粉酶催化水解,生成葡萄糖、麦芽糖和糊精。在底物充分(已知浓度)的条件下,未被水解的淀粉与碘液结合成蓝色化合物,其颜色的深浅与淀粉酶活性成反比。
  1.2.2检验试剂:①缓冲淀粉液(0.4g/L) R1:称取9g氯化钠, 22.6g无水磷酸氢二钠和12.5g无水磷酸二氢钾,溶于约500ml蒸馏水中,加热至沸。R2:另:取一个小烧杯,精准称取0.4g可溶性淀粉,加入约10ml蒸馏水,混匀后,至溶液成糊状。将R:2加入之前沸腾的溶液R1中,水洗烧杯一并倒入。冷至室温后加入5ml 37%甲醛溶液,用蒸馏水稀释至1000ml。该缓冲液pH为7.0±0.1,放置冰箱保存。②碘贮存液(0.1mol/L) 称取1.7835g 碘酸钾和22.5g碘化钾溶于400ml蒸馏水中。缓慢加入4.5ml浓盐酸,边加边搅拌,用蒸馏水稀释至500ml,充分混匀后,贮存于棕色瓶内并塞紧,放置于冰箱保存。③碘应用液(0.01mol/L) 取碘贮存液,用蒸馏水稀释10倍,贮存于棕色瓶内,冰箱保存可用1个月。
  1.2.3检验方法:①血清用生理盐水做10倍稀释;②取数支试管,标记测定管和空白管分别加入缓冲淀粉液1ml, 37℃预温5分钟;③测定管加入稀释血清0.2ml,混匀,将测定管和空白管置37℃水浴中7.5分钟;④测定管和空白管分别加入碘应用液1ml;⑤用蒸馏水调平,分别测定管加入6ml,空白管加入6.2ml,混匀;⑥用660nm波长,1cm光径,用蒸馏水调零,读取各管吸光度。
  2结果
  参考值:血清正常值800~1800U/L。
  3讨论
  α-淀粉酶广泛分布于动物(唾液、胰脏等)、植物(麦芽、山萮菜)及微生物。微生物的酶几乎都是分泌性的。α-淀粉酶以Ca2 为必需因子并作为稳定因子,既作用于直链淀粉,也作用于支链淀粉,无差别地切断α-1,4-链。因此,其特征是引起底物溶液粘度的急剧下降和碘反应的消失,最终产物在分解直链淀粉时以麦芽糖为主,此外,还有麦芽三糖及少量葡萄糖。另一方面在分解支链淀粉时,除麦芽糖、葡萄糖外,还生成分支部分具有α-1,6-键的α-极限糊精。一般分解限度以葡萄糖为准是35~50%,但是在细菌的淀粉酶中,也有呈现出高达70%分解限度的(最终游离出葡萄糖)。临床意义:急性胰腺炎、胰腺外伤、胰腺管组塞等疾患时,血清淀粉酶增加。特别常见于急性胰腺炎,从发病2小时开始血清淀粉酶活性迅速上升,12~24小时达最高峰,大多在参考范围上线四倍以上,3~4天恢复正常。发病后多在上高的窗口期进行检查时,90%以上急性胰腺炎患者可测出血清淀粉酶活性升高。若症状减轻可使酶释放量减少,或因病情恶化胰腺受到实质性破坏,淀粉酶含量可能正常或可能下降至正常值以下。血清淀粉酶持续性轻度增加时,必须考虑胰腺囊肿继发感染向慢性胰腺炎过渡,若有明显下降则预后不良。慢性胰腺炎淀粉酶升高不如急性胰腺炎淀粉酶升高显著,多为一过性,日间变化大。因此须反复测定血清淀粉酶,连续检查3天,从慢性胰腺炎发展成为胰腺萎缩、胰腺硬化时,血清淀粉酶活性则呈现出低值。胰腺癌患者的血清淀粉酶活性,并不一定经常出现异常,一般在早期时增高,到晚期则降低。一般认为在急性胰腺炎血清中淀粉酶活性会比较显著。
  参考文献
  [1]钟守先.胰腺外科.湖南科学技术出版社,1997:265-297.
  [2]周新,府伟灵等.临床生物化学与检验(第4版).北京:中国医药科技出版社人民卫生出版社,2011:119-120.
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