A组轮状病毒结构蛋白基因在马铃薯细胞中的初步表达

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目的在马铃薯细胞中表达轮状病毒结构蛋白.方法采用RT-PCR扩增截短VP4蛋白基因,克隆于植物表达载体pBI221,再双酶切pBI221,将带有CaMV35S启动子、外源基因及终止子的片段转入pSB11,通过三亲杂交方法,制备农杆菌转化载体pSB111-VP4,并对pSB111-VP4作点杂交检测,筛选鉴定重组子,对马铃薯组织细胞进行转化.结果转化细胞经Western 印迹检测其免疫活性, 具有良好的抗原性.结论为研制轮状病毒重组疫苗、亚单组疫苗、转基因植物口服疫苗做了前期准备.
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