鸡胚胎原始生殖细胞对不同冷冻体系适合性的研究

来源 :解剖学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:li359990774
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目的研究鸡胚胎原始生殖细胞(EPGCs)对不同冷冻体系的适合性. 方法对发育至第19期和第28期胚胎性腺PGCs,采用二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇、聚乙二醇为冷冻保护液,在不同组合、不同浓度、不同的冷冻程序下进行超低温冷冻保存.结果1.采用同一种冷冻保护液,10%浓度与15%浓度之间,除DMSO+乙二醇(冷冻保护液Ⅳ)外,其他类型的冷冻液对EPGCs保存后存活率的影响差异不显著(P>0.05);20%浓度的各种冷冻保护液对EPGCs保存后的存活率最低,且与10%和15%浓度相比差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);2.采用同一种冷冻保护液,浓度为10%时,冷冻程序Ⅰ(2~4℃平衡45~60min,-4~-6℃诱发结晶45min,悬挂液氮面1 h以上,投入液氮保存)和冷冻程序Ⅱ(2~4℃平衡90~120 min,悬挂液氮面1 h以上,投入液氮保存)对EPGCs冷冻后存活率差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);3.采用冷冻程序Ⅰ,浓度为10%时,不同的冷冻保护液对EPGCs保存后的存活率影响显著(P<0.05)或极显著(P<0.01),DMSO+乙二醇(冷冻保护液Ⅳ)显示出最好的保护效果;4.第19期和第28期性腺中的EPGCs在相同的冷冻条件下冷冻后,存活率差异不显著(P>0.05). 结论采用冷冻程序Ⅰ,在10%的DMSO+乙二醇(冷冻保护液Ⅳ)的保护下对鸡EPGCs冷冻较为适合.
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