【摘 要】
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为进一步研究人的一新蛋白--蛋白激酶C相关激酶1相关蛋白(AWP1)的结构、功能及与其相互作用的蛋白而进行GST-AWP融合蛋白表达载体的构建、原核表达、纯化及其抗体的制备.采用
【机 构】
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第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金，国家自然科学基金，国家自然科学基金
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为进一步研究人的一新蛋白--蛋白激酶C相关激酶1相关蛋白(AWP1)的结构、功能及与其相互作用的蛋白而进行GST-AWP融合蛋白表达载体的构建、原核表达、纯化及其抗体的制备.采用逆转录PCR(RT-PCR)法从人ECV304内皮细胞中扩增AWP1 cDNA编码区,并将其重组于谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合蛋白表达质粒pGEX-KG中.经酶切、序列鉴定分析后,用该重组质粒转化大肠杆菌BL21,并经异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导产生GST-AWP1融合蛋白,继而纯化获得了分子量约56 kD的融合蛋
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