GST融合蛋白表达系统在实验教学中的应用

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以GST-AQP7(Aquaporin 7)融合蛋白的原核表达为例,进行了生物学开放性实验教学的实践与探讨.利用PCR技术快速扩增小鼠AQP7-C末端亲水性肽段区基因片段,构建重组表达载体pGEX-4T-1∕AQP7,转化表达菌株 E.coli BL21,诱导表达GST-AQP7融合蛋白,并对目的蛋白亲和层析纯化.PCR鉴定和DNA测序结果表明,pGEX-4T-1∕AQP7重组表达载体构建正确,SDS-PAGE蛋白电泳结果证实GST-AQP7高效表达并成功纯化.经过上述实验过程,学生系统掌握了从基因操作到
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