【摘 要】
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为制备蓝舌病病毒（BTV）NS3基因标准样品并建立BTV通用型荧光定量RT-PCR检测方法,本研究首先从BTV-1型核酸中扩增完整的NS3基因,经克隆测序后,采用体外转录方法制备其cRNA。使用
【机 构】
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北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心
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为制备蓝舌病病毒（BTV）NS3基因标准样品并建立BTV通用型荧光定量RT-PCR检测方法,本研究首先从BTV-1型核酸中扩增完整的NS3基因,经克隆测序后,采用体外转录方法制备其cRNA。使用RNA保存液稀释至含量约10^8拷贝/μL,分装后进行均匀度和稳定性检验,并通过联合定值确定标准样品的量值。结果表明,BTV NS3标准样品的瓶间差异〈5%,均匀度和稳定性良好;定值结果为（1.032±0.02）×10^8拷贝/μL。此外,使用该BTV标准样品作为模板,通过优化反应体系和条件,建
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