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根据菌体蛋白可以刺激机体产生相应抗体的原理，建立了以产气荚膜梭菌粗提菌体蛋白为抗原的检测牛D型产气荚膜梭菌抗体的间接ELISA。结果显示，D型产气荚膜梭菌菌体裂解抗原最适包被浓度为50μg／mL，最适包被条件为37℃1h；被检血清的最适稀释度为1：100，酶标二抗的最适工作浓度为1：1000，血清与酶标二抗的反应时间均为37℃1h；最适封闭时间为37℃1h；PBST稀释液中脱脂乳的浓度为30g／L；底物最适反应条件为室温25min；阴阳性临界值为0．032。对采集于吉林省延边州的100份牛血清样品采用建立