论文部分内容阅读
目的 研究慢性肾衰竭兔血清对其主动脉平滑肌细胞增殖和核因子κB(NF-κB)活化的影响,并探讨其作用的可能机制.方法 建立慢性肾衰竭兔模型,采集血清.采用原代培养的兔主动脉平滑肌细胞,用不同浓度的慢性肾衰竭兔血清刺激不同时间,四甲基偶氮噻唑盐(MTF)法检测细胞增殖;Hoechst33342染色观察细胞凋亡;Western印迹检测慢性肾衰竭血清对主动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、NF-κB p65蛋白表达的影响;免疫荧光观察NF-κB p65核转位.结果 (1)在较低浓度(≤10%)时,慢性肾衰竭兔血清对平滑肌细胞的增殖有明显的促进作用,且呈浓度、时间依赖性;但血清浓度继续增加后,对平滑肌细胞的促增殖作用却明显减弱,与正常血清组差异有统计学意义(P<0.05).(2)Hoechst33342染色表明,慢性肾衰竭血清在低浓度时(≤10%)细胞凋亡率和正常血清组差异无统计学意义(P>0.05),但高浓度(>10%)时,平滑肌细胞凋亡率增加,与正常血清组差异有统计学意义(P<0.01).(3)慢性肾衰竭血清刺激24 h后,低浓度促进PCNA、NF-κB p65蛋白表达,高浓度抑制PCNA、NF-κB p65表达,与正常血清组差异有统计学意义(P<0.01).(4)10%慢性肾衰竭血清与平滑肌细胞孵育24 h后免疫荧光显示,NF-κB p65发生了核转位.结论 不同浓度的慢性肾衰竭兔血清可导致平滑肌细胞增殖或凋亡,其促增殖作用可能与其活化了NF-κB有关.本研究为防治慢性肾衰竭加速性动脉粥样硬化提供理论依据。