【摘 要】
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采用基因挖掘技术,从NCBI数据库发现来源于Glaciecola polaris的葡萄糖3脱氢酶基因,该基因经密码子优化后合成,构建pET28b-GpG3DH重组表达载体,转入大肠杆菌E.coli BL21中进
【基金项目】
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国家自然科学基金青年基金(21102131),浙江省自然科学基金(LY18C010002).
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采用基因挖掘技术,从NCBI数据库发现来源于Glaciecola polaris的葡萄糖3脱氢酶基因,该基因经密码子优化后合成,构建pET28b-GpG3DH重组表达载体,转入大肠杆菌E.coli BL21中进行重组表达,结果显示:GpG3DH实现了部分可溶表达,其分子量为5.5×10^4。随后,优化了GpG3DH的表达条件,结果发现,重组菌在TB培养基中37℃培养至OD600为0.8时,加入IPTG至终浓度为0.5mmol/L,16℃诱导表达10h,GpG3DH酶活为2.83×10^
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