【摘 要】
：
目的 通过对斑马鱼受精卵进行显微注射剪接吗啉环反义寡核苷酸,使其铁调素基因敲降,观察铁调素表达抑制后对斑马鱼骨代谢的影响,探讨铁调素抑制对于骨代谢影响的机制.方法 以
【机 构】
：
南京医科大学附属无锡市第二人民医院骨科,无锡,214000215004,苏州大学附属第二医院骨科;
论文部分内容阅读
目的 通过对斑马鱼受精卵进行显微注射剪接吗啉环反义寡核苷酸,使其铁调素基因敲降,观察铁调素表达抑制后对斑马鱼骨代谢的影响,探讨铁调素抑制对于骨代谢影响的机制.方法 以受精后0.5h斑马鱼的受精卵为模型,予以不同浓度的剪接吗啉环反义寡核苷酸显微注射受精卵,将注射后的幼鱼于第4天进行提取RNA,反转录成cDNA,进行鉴定后得到适当浓度.在浓度为25 mg/L的剪接吗啉环反义寡核苷酸注射条件下,对注射剪接吗啉环反义寡核苷酸后的幼鱼于第4天进行铁染色,与野生型比较观察铁含量变化,对注射剪接吗啉环反义寡核苷酸后的幼鱼于第9天分别进行茜素红和阿可辛蓝染色,与野生型比较硬骨和软骨的形态差异;对注射剪接吗啉环反义寡核苷酸后的幼鱼于第4天提取的cDNA采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测相关成骨代谢的基因表达,比较和野生型基因组成骨下游基因的差异.对注射剪接吗啉环反义寡核苷酸后第4天斑马鱼予以成骨代表性的两个基因Runx2a和sp7进行原位杂交,比较野生型的幼鱼相关成骨基因表达部位的差异和信号强弱.结果 对注射剪接吗啉环反义寡核苷酸后第4天斑马鱼进行铁染色,与野生型染色比较色素沉着明显变深,对注射剪接吗啉环反义寡核苷酸后第9天斑马鱼进行茜素红和阿尔辛蓝染色分别与野生型染色比较,硬骨茜素红染色变浅且肋骨及尾鳍未发育,软骨阿尔辛蓝染色未有明显改变,注射剪接吗啉环反义寡核苷酸后第4天的斑马鱼行FQ-PCR进行检测相关成骨代谢的基因表达量与野生型斑马鱼成骨基因表达比较均下调,尤其以Runx2a和sp7最为显著,野生型分别为1.00790±0.011 17和1.124 50±0.17607降至处理后的0.256 39±0.016 07和0.331 47±0.074 36.对于注射剪接吗啉环反义寡核苷酸后第4天斑马鱼进行Runx2a和sp7原位杂交的信号表达弱于同期野生型的斑马鱼.结论 敲降斑马鱼的铁调素造成斑马鱼体内铁蓄积,使得斑马鱼的成骨基因降低,造成骨发育迟缓,骨量减低.
其他文献
在当前的新课程改革环境下,教育创新成为一种主要的发展形势,传统小学体育教学中表现出较多的弊端,影响到课堂教学的有效性,同时也不利于学生综合素质的培养,对小学体育教学
对比分析了应用于城市轨道交通自动监控系统的DDC(直接数字控制器)和PLC(可编程逻辑控制器)两种设备的性能,并以上海轨道交通2号线自动监控系统的互联互通项目为例,介绍了基
脂肪源性干细胞( ADSC)具有取材方便、对供体损伤小,以及少量组织即可获取大量干细胞等优点.我们的前期研究表明,ADSC可减轻肾小管上皮细胞结构的损伤,抑制细胞凋亡,而将低氧诱导因子(HIF-1α)转染ADSC后其作用更为明显.本研究观察ADSC移植对急性肾损伤小鼠模型肾功能、肾组织学等变化的影响。
某厂在技术改造中所安装的加热炉风机运行时产生的噪声严重污染环境并有损职工健康。针对加热炉风机噪声特征,在风机进口处设计安装了阻性复合消声器,改进风口的软连接,增强
葫芦丝是我国的一种民族乐器,它音质如丝绸般柔美,并且携带方便,近几年来颇为流行.为普及民族音乐,弘扬中华民族文化,让更多的人尤其是少年儿童了解、喜欢葫芦丝.在学前指导
The dielectric performance of alkali activated slag (AAS) cement paste was investigated in the frequency range of 1 to 1000 MHz. The experimental results showed
目的 探讨不同退变程度关节软骨细胞外基质降解酶DNA甲基化水平.方法 收集因退行性骨关节病(0A)行膝关节置换术患者的关节软骨40例.根据Outerbridge分级对所取软骨组织行组织
工业测量中,传统移站测量法的点位测量误差会随着移站次数的增加不断累积增加,导致最终的测量精度不可控。讨论了基于原始观测值和基于坐标观测值的两种整体平差数据融合方法,与传统移站测量法相比,这两种方法解算的点位精度较高且稳定。实验表明,即使融合的函数模型和随机模型等价,采用不同的融合方法,得到的融合结果并不完全等价。在实际应用中需根据具体情况选择不同的融合方法,从而得到解算精度可靠的待测点坐标。