【摘 要】
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构建的溶栓和抗栓双重功能的RGD-葡激酶突变体(RGD-Sak) 在大肠杆菌中高表达,目的蛋白质以包涵体形式存在.为获得有活性的蛋白质,需要对包涵体进行变复性.利用凝胶层析方法对
【机 构】
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复旦大学教育部分子医学重点实验室,复旦大学生命科学院
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)
论文部分内容阅读
构建的溶栓和抗栓双重功能的RGD-葡激酶突变体(RGD-Sak) 在大肠杆菌中高表达,目的蛋白质以包涵体形式存在.为获得有活性的蛋白质,需要对包涵体进行变复性.利用凝胶层析方法对包涵体中RGD-Sak进行复性,并与稀释复性法进行比较 ,发现凝胶柱复性方法具有操作周期短、简便、成本低而高效等优点.复性后蛋白质用Q-S epharose FF离子交换进一步纯化,纯度达95%,酪蛋白凝胶板活性测定表明两种复性法得到的蛋白质比活性相当.圆二色谱测定显示两种复性法得到的蛋白质的二级结构成份和谱形一致,说明在两种复性
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