【摘 要】
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目的建立测定虫草头孢菌粉中16种氨基酸含量的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。方法样品以6 mol.L-1盐酸于110℃水解24 h,内标为正亮氨酸,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,衍
【机 构】
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浙江省食品药品检验研究院,杭州市药品检验所
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目的建立测定虫草头孢菌粉中16种氨基酸含量的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。方法样品以6 mol.L-1盐酸于110℃水解24 h,内标为正亮氨酸,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,衍生后进行HPLC分析。采用Agela Venusil XBP C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温为40℃;流动相A为0.1 mol.L-1醋酸-醋酸钠缓冲液(pH 6.5)-乙腈(95∶5),流动相B为乙腈-水(4∶1),梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为254 nm。结果 16种氨基酸浓度在1.81～7.50μg.mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.998 3～1.000 0);平均回收率除组氨酸、甲硫氨酸分别为92.9%和90.6%外,其余14种氨基酸在95.3%～104.1%之间;RSD除组氨酸、甲硫氨酸分别为2.8%和3.3%外,其余均<2.0%。结论该方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,可用于虫草头孢菌粉中氨基酸的检测。
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